बुनियादी आणविक जीवविज्ञान शब्दों की व्याख्या
1. सीडीएनए और सीसीडीएनए: सीडीएनए एक डबल-स्ट्रैंडेड डीएनए है जिसे एमआरएनए से रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस द्वारा संश्लेषित किया जाता है;सीसीसीडीएनए क्रोमोसोम से मुक्त एक प्लास्मिड डबल-स्ट्रैंडेड बंद गोलाकार डीएनए है।
2. मानक तह इकाई: प्रोटीन माध्यमिक संरचना इकाई α-हेलिक्स और β-शीट विभिन्न कनेक्टिंग पॉलीपेप्टाइड्स के माध्यम से विशेष ज्यामितीय व्यवस्था के साथ संरचनात्मक ब्लॉक बना सकती है।इस प्रकार की निर्धारित तह को आमतौर पर सुपर सेकेंडरी संरचना कहा जाता है।लगभग सभी तृतीयक संरचनाओं को इन तह प्रकारों और यहां तक कि उनके संयुक्त प्रकारों द्वारा वर्णित किया जा सकता है, इसलिए उन्हें मानक तह इकाइयाँ भी कहा जाता है।
3. CAP: चक्रीय एडेनोसिन मोनोफॉस्फेट (cAMP) रिसेप्टर प्रोटीन CRP (cAMP रिसेप्टर प्रोटीन), cAMP और CRP के संयोजन के बाद बनने वाले कॉम्प्लेक्स को सक्रिय प्रोटीन CAP (cAMP सक्रिय प्रोटीन) कहा जाता है।
4. पैलिंड्रोमिक अनुक्रम: डीएनए टुकड़े के एक खंड का विपरीत पूरक अनुक्रम, जो अक्सर एक प्रतिबंध एंजाइम साइट होता है।
5. माइक्रोआरएनए: पूरक हस्तक्षेप करने वाला आरएनए या एंटीसेंस आरएनए, जो एमआरएनए अनुक्रम का पूरक है और एमआरएनए के अनुवाद को रोक सकता है।
6. राइबोजाइम: उत्प्रेरक गतिविधि वाला आरएनए, जो आरएनए की स्प्लिसिंग प्रक्रिया में एक ऑटोकैटलिटिक भूमिका निभाता है।
7. मोटिफ: प्रोटीन अणुओं की स्थानिक संरचना में समान त्रि-आयामी आकार और टोपोलॉजी वाले कुछ स्थानीय क्षेत्र हैं
8. सिग्नल पेप्टाइड: प्रोटीन संश्लेषण के दौरान एन-टर्मिनस पर 15-36 अमीनो एसिड अवशेषों वाला एक पेप्टाइड, जो प्रोटीन के ट्रांसमेम्ब्रेन को निर्देशित करता है।
9. एटेन्यूएटर: एक ऑपरेटर क्षेत्र और एक संरचनात्मक जीन के बीच एक न्यूक्लियोटाइड अनुक्रम जो प्रतिलेखन को समाप्त करता है।
10. मैजिक स्पॉट: जब बैक्टीरिया बढ़ता है और अमीनो एसिड की पूरी कमी का सामना करता है, तो बैक्टीरिया सभी जीनों की अभिव्यक्ति को रोकने के लिए एक आपातकालीन प्रतिक्रिया उत्पन्न करेगा।इस आपातकालीन प्रतिक्रिया को उत्पन्न करने वाले संकेत ग्वानोसिन टेट्राफॉस्फेट (पीपीजीपीपी) और ग्वानोसिन पेंटाफॉस्फेट (पीपीपीजीपीपी) हैं।PpGpp और pppGpp की भूमिका सिर्फ एक या कुछ ऑपेरॉन की नहीं है, बल्कि बड़ी संख्या में उन्हें प्रभावित करती है, इसलिए उन्हें सुपर-रेगुलेटर या मैजिक स्पॉट कहा जाता है।
11. अपस्ट्रीम प्रमोटर तत्व: डीएनए अनुक्रम को संदर्भित करता है जो प्रमोटर की गतिविधि में नियामक भूमिका निभाता है, जैसे -10 क्षेत्र में टाटा, -35 क्षेत्र में टीजीएसीए, एन्हांसर और एटेन्यूएटर।
12. डीएनए जांच: ज्ञात अनुक्रम के साथ डीएनए का एक लेबल खंड, जिसका व्यापक रूप से अज्ञात अनुक्रमों का पता लगाने और लक्ष्य जीन को स्क्रीन करने के लिए उपयोग किया जाता है।
13. एसडी अनुक्रम: यह राइबोसोम और एमआरएनए का बंधन अनुक्रम है, जो अनुवाद को नियंत्रित करता है।
14. मोनोक्लोनल एंटीबॉडी: एक एंटीबॉडी जो केवल एक एंटीजेनिक निर्धारक के खिलाफ कार्य करती है।
15. कॉस्मिड: यह एक कृत्रिम रूप से निर्मित बहिर्जात डीएनए वेक्टर है जो फ़ेज़ के दोनों सिरों पर सीओएस क्षेत्रों को बनाए रखता है और प्लास्मिड से जुड़ा होता है।
16. ब्लू-व्हाइट स्पॉट स्क्रीनिंग: लैक्ज़ जीन (β-गैलेक्टोसिडेज़ को एन्कोडिंग), एंजाइम क्रोमोजेनिक सब्सट्रेट एक्स-गैल (5-ब्रोमो-4-क्लोरो-3-इंडोल-बीटा-डी-गैलेक्टोसाइड) को विघटित करके नीला उत्पादन कर सकता है, जिससे स्ट्रेन नीला हो जाता है।जब बहिर्जात डीएनए डाला जाता है, तो लैकज़ जीन को व्यक्त नहीं किया जा सकता है, और तनाव सफेद होता है, ताकि पुनः संयोजक बैक्टीरिया की जांच की जा सके।इसे ब्लू-व्हाइट स्क्रीनिंग कहा जाता है।
17. सीआईएस-अभिनय तत्व: डीएनए में आधारों का एक विशिष्ट अनुक्रम जो जीन अभिव्यक्ति को नियंत्रित करता है।
18. क्लेनो एंजाइम: डीएनए पोलीमरेज़ I का बड़ा टुकड़ा, सिवाय इसके कि 5' 3' एक्सोन्यूक्लिज़ गतिविधि को डीएनए पोलीमरेज़ I होलोनीज़ाइम से हटा दिया जाता है
19. एंकर्ड पीसीआर: एक छोर पर ज्ञात अनुक्रम के साथ रुचि के डीएनए को बढ़ाने के लिए उपयोग किया जाता है।अज्ञात अनुक्रम के एक छोर पर एक पॉली-डीजी टेल जोड़ा गया था, और फिर पॉली-डीसी और ज्ञात अनुक्रम को पीसीआर प्रवर्धन के लिए प्राइमर के रूप में उपयोग किया गया था।
20. संलयन प्रोटीन: यूकेरियोटिक प्रोटीन का जीन बहिर्जात जीन से जुड़ा होता है, और मूल जीन प्रोटीन और बहिर्जात प्रोटीन के अनुवाद से बना प्रोटीन एक ही समय में व्यक्त होता है।
अन्य आणविक जीवविज्ञान शब्द
1. डीएनए का भौतिक मानचित्र वह क्रम है जिसमें डीएनए अणु के (प्रतिबंध एंडोन्यूक्लिज़-डाइजेस्ट) टुकड़े व्यवस्थित होते हैं।
2. RNase की दरार को दो प्रकारों (ऑटोकैटलिसिस) और (हेटरोकैटलिसिस) में विभाजित किया गया है।
3. प्रोकैरियोट्स में तीन आरंभिक कारक हैं (IF-1), (IF-2) और (IF-3)।
4. ट्रांसमेम्ब्रेन प्रोटीन को मार्गदर्शन (सिग्नल पेप्टाइड्स) की आवश्यकता होती है, और प्रोटीन चैपरोन की भूमिका होती है (पेप्टाइड श्रृंखला को प्रोटीन की मूल रचना में मोड़ने में मदद करता है)।
5. प्रमोटरों में तत्वों को आम तौर पर दो प्रकारों में विभाजित किया जा सकता है: (कोर प्रमोटर तत्व) और (अपस्ट्रीम प्रमोटर तत्व)।
6. आणविक जीव विज्ञान की अनुसंधान सामग्री में मुख्य रूप से तीन भाग शामिल हैं: (संरचनात्मक आणविक जीव विज्ञान), (जीन अभिव्यक्ति और विनियमन), और (डीएनए पुनर्संयोजन प्रौद्योगिकी)।
7. डीएनए आनुवंशिक सामग्री है यह प्रदर्शित करने वाले दो प्रमुख प्रयोग हैं (चूहों का न्यूमोकोकस संक्रमण) और (एस्चेरिचिया कोली का टी2 फेज संक्रमण)।संभावना)।
8. एचएनआरएनए और एमआरएनए के बीच दो मुख्य अंतर हैं: (एचएनआरएनए को एमआरएनए में परिवर्तित करने की प्रक्रिया में जोड़ा जाता है), (एमआरएनए के 5' सिरे को एम7पीजीपीपीपी कैप के साथ जोड़ा जाता है, और एमआरएनए एसिड (पॉलीए) टेल के 3' सिरे पर एक अतिरिक्त पॉलीएडेनाइलेशन होता है)।
9. प्रोटीन के मल्टी-सबयूनिट रूप के फायदे हैं (सबयूनिट डीएनए उपयोग के लिए एक किफायती तरीका है), (प्रोटीन गतिविधि पर प्रोटीन संश्लेषण में यादृच्छिक त्रुटियों के प्रभाव को कम कर सकता है), (गतिविधि को बहुत कुशलतापूर्वक और तेजी से खोला और बंद किया जा सकता है)।
10. प्रोटीन फोल्डिंग मैकेनिज्म के पहले न्यूक्लिएशन सिद्धांत की मुख्य सामग्री में (न्यूक्लिएशन), (संरचनात्मक संवर्धन), (अंतिम पुनर्व्यवस्था) शामिल हैं।
11. गैलेक्टोज का बैक्टीरिया पर दोहरा प्रभाव पड़ता है;एक ओर (इसे कोशिका वृद्धि के लिए कार्बन स्रोत के रूप में उपयोग किया जा सकता है);दूसरी ओर (यह कोशिका भित्ति का भी एक घटक है)।इसलिए, पृष्ठभूमि स्तर पर स्थायी संश्लेषण के लिए एक सीएमपी-सीआरपी-स्वतंत्र प्रमोटर एस2 की आवश्यकता होती है;साथ ही, उच्च-स्तरीय संश्लेषण को विनियमित करने के लिए एक सीएमपी-सीआरपी-निर्भर प्रमोटर एस1 की आवश्यकता होती है।ट्रांसक्रिप्शन G के साथ (S2) से और G के बिना (S1) से शुरू होता है।
12. पुनः संयोजक डीएनए तकनीक को (जीन क्लोनिंग) या (आणविक क्लोनिंग) के रूप में भी जाना जाता है।अंतिम लक्ष्य है (एक जीव में आनुवंशिक जानकारी डीएनए को दूसरे जीव में स्थानांतरित करना)।एक विशिष्ट डीएनए पुनर्संयोजन प्रयोग में आमतौर पर निम्नलिखित चरण शामिल होते हैं: (1) दाता जीव के लक्ष्य जीन (या बहिर्जात जीन) को निकालें, और एक नया पुनः संयोजक डीएनए अणु बनाने के लिए इसे एंजाइमेटिक रूप से दूसरे डीएनए अणु (क्लोनिंग वेक्टर) से जोड़ें।② पुनः संयोजक डीएनए अणु को प्राप्तकर्ता कोशिका में स्थानांतरित किया जाता है और प्राप्तकर्ता कोशिका में दोहराया जाता है।इस प्रक्रिया को परिवर्तन कहा जाता है।③ उन प्राप्तकर्ता कोशिकाओं की जांच करें और पहचानें जिन्होंने पुनः संयोजक डीएनए को अवशोषित कर लिया है।विदेशी सहायता जीन व्यक्त है या नहीं यह पता लगाने के लिए बड़ी मात्रा में पुनः संयोजक डीएनए युक्त कोशिकाओं का संवर्धन करें।
13. प्लास्मिड प्रतिकृति दो प्रकार की होती है: जो मेजबान कोशिका प्रोटीन संश्लेषण द्वारा सख्ती से नियंत्रित होती हैं उन्हें (टाइट प्लास्मिड) कहा जाता है, और जो मेजबान कोशिका प्रोटीन संश्लेषण द्वारा सख्ती से नियंत्रित नहीं होती हैं उन्हें (रिलैक्स्ड प्लास्मिड) कहा जाता है।
14. पीसीआर प्रतिक्रिया प्रणाली में निम्नलिखित स्थितियाँ होनी चाहिए: a.अलग किए जाने वाले लक्ष्य जीन के दो स्ट्रैंड के प्रत्येक छोर पर पूरक अनुक्रमों के साथ डीएनए प्राइमर (लगभग 20 आधार)।बी।थर्मल स्थिरता वाले एंजाइम जैसे: टैगडीएनए पोलीमरेज़।सी, डीएनटीपीडी, टेम्पलेट के रूप में रुचि का डीएनए अनुक्रम
15. पीसीआर की मूल प्रतिक्रिया प्रक्रिया में तीन चरण शामिल हैं: (विकृतीकरण), (एनीलिंग), और (विस्तार)।
16. ट्रांसजेनिक जानवरों की मूल प्रक्रिया में आमतौर पर शामिल हैं: ①एक निषेचित अंडे या भ्रूण स्टेम सेल के नाभिक में क्लोन किए गए विदेशी जीन का परिचय;②इनोक्युलेटेड निषेचित अंडे या भ्रूण स्टेम सेल का महिला गर्भाशय में प्रत्यारोपण;विदेशी जीन वाली संतानों के लिए पूर्ण भ्रूण विकास और वृद्धि;④ इन जानवरों का उपयोग करें जो नई समयुग्मजी रेखाओं के प्रजनन के लिए प्रजनन स्टॉक के रूप में विदेशी प्रोटीन का उत्पादन कर सकते हैं।
17. हाइब्रिडोमा कोशिका रेखाएं (प्लीहा बी) कोशिकाओं को (मायलोमा) कोशिकाओं के साथ संकरण द्वारा उत्पन्न होती हैं, और चूंकि (प्लीहा कोशिकाएं) हाइपोक्सैन्थिन का उपयोग कर सकती हैं और (अस्थि कोशिकाएं) कोशिका विभाजन कार्य प्रदान करती हैं, इसलिए उन्हें एचएटी माध्यम में विकसित किया जा सकता है।बढ़ना।
18. शोध के गहराने से एंटीबॉडी की पहली पीढ़ी को (पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी), दूसरी पीढ़ी को (मोनोक्लोनल एंटीबॉडी) और तीसरी पीढ़ी को (जेनेटिक इंजीनियरिंग एंटीबॉडी) कहा जाता है।
19. वर्तमान में, कीट विषाणुओं की आनुवंशिक इंजीनियरिंग मुख्य रूप से बैकुलोवायरस पर केंद्रित है, जो (बहिर्जात विष जीन) की शुरूआत में प्रकट होता है;(जीन जो कीड़ों के सामान्य जीवन चक्र को बाधित करते हैं);(वायरस जीन का संशोधन)।
20. स्तनधारी आरएनए पोलीमरेज़ II प्रमोटर में सामान्य तत्व TATA, GC, और CAAT के अनुरूप ट्रांस-एक्टिंग प्रोटीन कारक क्रमशः (TFIID), (SP-1) और (CTF/NF1) हैं।
इक्कीस।आरएनए पोलीमरेज़ Ⅱ के मूल प्रतिलेखन कारक हैं, TFⅡ-A, TFⅡ-B, TFII-D, TFⅡ-E, और उनका बंधन क्रम है: (D, A, B, E)।वहीं TFII-D का कार्य (TATA बॉक्स से जुड़ना) है।
बाईस।डीएनए से जुड़ने वाले अधिकांश प्रतिलेखन कारक डिमर के रूप में काम करते हैं।डीएनए से जुड़ने वाले प्रतिलेखन कारकों के कार्यात्मक डोमेन आमतौर पर निम्नलिखित हैं (हेलिक्स-टर्न-हेलिक्स), (जिंक फिंगर मोटिफ), (बेसिक-ल्यूसीन) जिपर मोटिफ)।
तेईस।प्रतिबंध एंडोन्यूक्लिज़ क्लीवेज मोड तीन प्रकार के होते हैं: (5' चिपचिपे सिरे उत्पन्न करने के लिए समरूपता अक्ष के 5' किनारे पर काटें), (3' चिपचिपे सिरे उत्पन्न करने के लिए समरूपता अक्ष के 3' किनारे पर काटें (समरूपता अक्ष पर समतल खंड उत्पन्न करने के लिए काटें))।
चौबीस।प्लास्मिड डीएनए के तीन अलग-अलग विन्यास हैं: (एससी विन्यास), (ओसी विन्यास), (एल विन्यास)।वैद्युतकणसंचलन में पहला है (एससी विन्यास)।
25. बहिर्जात जीन अभिव्यक्ति प्रणाली, मुख्य रूप से (एस्चेरिचिया कोली), (खमीर), (कीट) और (स्तनधारी कोशिका तालिका)।
26. ट्रांसजेनिक जानवरों के लिए आमतौर पर इस्तेमाल की जाने वाली विधियाँ हैं: (रेट्रोवायरल संक्रमण विधि), (डीएनए माइक्रोइंजेक्शन विधि), (भ्रूण स्टेम सेल विधि)।
अनुप्रयोग आण्विक जीवविज्ञान
1. 5 से अधिक आरएनए के कार्यों का नाम बताएं?
ट्रांसफर आरएनए टीआरएनए ट्रांसफर एमिनो एसिड राइबोसोम आरएनए आरआरएनए राइबोसोम मैसेंजर आरएनए एमआरएनए प्रोटीन संश्लेषण टेम्पलेट का गठन करता है विषम परमाणु आरएनए एचएनआरएनए परिपक्व एमआरएनए का अग्रदूत छोटे परमाणु आरएनए एसएनआरएनए एचएनआरएनए स्प्लिसिंग में शामिल छोटे साइटोप्लाज्मिक आरएनए स्क्रैन/7एसएल-आरएनए प्रोटीन प्लाज्मा रेटिकुलम-स्थानीयकृत और संश्लेषित सिग्नल पहचान शरीर के घटक एंटीसेंस आरएनए एनआरएनए/माइक्रोआरएनए जीन अभिव्यक्ति को नियंत्रित करता है राइबोजाइम आरएनए एंजाइमेटिक सहयोगी सक्रिय आरएनए
2. प्रोकैरियोटिक और यूकेरियोटिक प्रवर्तकों के बीच मुख्य अंतर क्या है?
प्रोकैरियोटिक टीटीजीएसीए --- टाटाएटी------दीक्षा स्थल-35 -10 यूकेरियोटिक एन्हांसर---जीसी ---सीएएटी----टाटा-5एमजीपीपी-दीक्षा स्थल-110 -70 -25
3. प्राकृतिक प्लास्मिड के कृत्रिम निर्माण के मुख्य पहलू क्या हैं?
प्राकृतिक प्लास्मिड में अक्सर दोष होते हैं, इसलिए वे आनुवंशिक इंजीनियरिंग के लिए वाहक के रूप में उपयोग के लिए उपयुक्त नहीं हैं, और उन्हें संशोधित और निर्मित किया जाना चाहिए: ए।उपयुक्त चयन मार्कर जीन जोड़ें, जैसे कि दो या अधिक, जो चयन के लिए उपयोग करना आसान है, आमतौर पर एंटीबायोटिक जीन।बी।पुनर्संयोजन की सुविधा के लिए उपयुक्त एंजाइम काटने वाली साइटों को बढ़ाएं या घटाएं।सी।लंबाई कम करें, अनावश्यक टुकड़े काटें, आयात दक्षता में सुधार करें और लोडिंग क्षमता बढ़ाएं।डी।प्रतिकृति को चुस्त से ढीला, कम प्रतियों से अधिक प्रतियों में बदलें।इ।जेनेटिक इंजीनियरिंग की विशेष आवश्यकताओं के अनुसार विशेष जेनेटिक तत्व जोड़ें
4. ऊतक-विशिष्ट सीडीएनए की विभेदक जांच के लिए एक विधि का उदाहरण दें?
दो कोशिका आबादी तैयार की जाती है, एक कोशिका में लक्ष्य जीन व्यक्त या अत्यधिक व्यक्त किया जाता है, और दूसरे कोशिका में लक्ष्य जीन व्यक्त नहीं किया जाता है या कम व्यक्त किया जाता है, और फिर संकरण और तुलना द्वारा लक्ष्य जीन पाया जाता है।उदाहरण के लिए, ट्यूमर की घटना और विकास के दौरान, ट्यूमर कोशिकाएं सामान्य कोशिकाओं की तुलना में विभिन्न अभिव्यक्ति स्तरों के साथ एमआरएनए प्रस्तुत करेंगी।इसलिए, विभेदक संकरण द्वारा ट्यूमर से संबंधित जीन की जांच की जा सकती है।प्रेरण विधि का उपयोग उन जीनों की जांच करने के लिए भी किया जा सकता है जिनकी अभिव्यक्ति प्रेरित है।
5. हाइब्रिडोमा सेल लाइनों का निर्माण और स्क्रीनिंग?
प्लीहा बी कोशिकाएं + मायलोमा कोशिकाएं, कोशिका संलयन को बढ़ावा देने के लिए पॉलीइथाइलीन ग्लाइकोल (पीईजी) जोड़ती हैं, और एचएटी माध्यम (हाइपोक्सैन्थिन, एमिनोप्टेरिन, टी युक्त) में विकसित होने वाली प्लीहा बी-मायलोमा संलयन कोशिकाएं पोषण का विस्तार जारी रखती हैं।कोशिका संलयन में शामिल हैं: प्लीहा-प्लीहा संलयन कोशिकाएं: बढ़ने में असमर्थ, प्लीहा कोशिकाओं को इन विट्रो में संवर्धित नहीं किया जा सकता है।अस्थि-अस्थि संलयन कोशिकाएं: हाइपोक्सैन्थिन का उपयोग नहीं कर सकती हैं, लेकिन फोलेट रिडक्टेस का उपयोग करके दूसरे मार्ग के माध्यम से प्यूरीन को संश्लेषित कर सकती हैं।एमिनोप्टेरिन फोलेट रिडक्टेस को रोकता है और इस प्रकार बढ़ नहीं पाता है।अस्थि-प्लीहा संलयन कोशिकाएं: एचएटी में विकसित हो सकती हैं, प्लीहा कोशिकाएं हाइपोक्सैन्थिन का उपयोग कर सकती हैं, और अस्थि कोशिकाएं कोशिका विभाजन कार्य प्रदान करती हैं।
6. डाइडॉक्सी टर्मिनल टर्मिनेशन विधि (सेंगर विधि) द्वारा डीएनए की प्राथमिक संरचना निर्धारित करने का सिद्धांत और विधि क्या है?
सिद्धांत डीएनए के विस्तार को समाप्त करने के लिए न्यूक्लियोटाइड श्रृंखला टर्मिनेटर-2,,3,-डाइडोक्सिन्यूक्लियोटाइड का उपयोग करना है।चूँकि इसमें 3/5/फॉस्फोडिएस्टर बांड के निर्माण के लिए आवश्यक 3-OH की कमी होती है, एक बार डीएनए श्रृंखला में शामिल होने के बाद, डीएनए श्रृंखला को आगे नहीं बढ़ाया जा सकता है।बेस पेयरिंग के सिद्धांत के अनुसार, जब भी डीएनए पोलीमरेज़ को सामान्य रूप से विस्तारित डीएनए श्रृंखला में भाग लेने के लिए dNMP की आवश्यकता होती है, तो दो संभावनाएं होती हैं, एक है ddNTP में भाग लेना, जिसके परिणामस्वरूप डीऑक्सीन्यूक्लियोटाइड श्रृंखला विस्तार समाप्त हो जाता है;दूसरा है dNTP में भाग लेना, ताकि अगले ddNTP के शामिल होने तक डीएनए श्रृंखला का विस्तार जारी रह सके।इस विधि के अनुसार, ddNTP में समाप्त होने वाले विभिन्न लंबाई के डीएनए टुकड़ों का एक समूह प्राप्त किया जा सकता है।विधि क्रमशः चार समूहों ddAMP, ddGMP, ddCMP और ddTMP में विभाजित करना है।प्रतिक्रिया के बाद, पॉलीएक्रिलामाइड जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस स्विमिंग बैंड के अनुसार डीएनए अनुक्रम को पढ़ सकता है।
7. प्रतिलेखन पर एक्टिवेटर प्रोटीन (सीएपी) का सकारात्मक विनियमन प्रभाव क्या है?
चक्रीय एडिनाइलेट (सीएएमपी) रिसेप्टर प्रोटीन सीआरपी (सीएएमपी रिसेप्टर प्रोटीन), सीएमपी और सीआरपी के संयोजन से बने कॉम्प्लेक्स को सीएपी (सीएमपीएक्टिवेटेड प्रोटीन) कहा जाता है।जब ई. कोलाई को ग्लूकोज की कमी वाले माध्यम में उगाया जाता है, तो सीएपी का संश्लेषण बढ़ जाता है, और सीएपी में लैक्टोज (एलएसी) जैसे प्रमोटरों को सक्रिय करने का कार्य होता है।कुछ सीआरपी-निर्भर प्रमोटरों में सामान्य प्रमोटरों की तरह विशिष्ट -35 क्षेत्र अनुक्रम सुविधा (टीटीजीएसीए) का अभाव होता है।इसलिए, आरएनए पोलीमरेज़ के लिए इससे जुड़ना मुश्किल है।सीएपी (फ़ंक्शन) की उपस्थिति: एंजाइम और प्रमोटर के बाइंडिंग स्थिरांक में काफी सुधार कर सकती है।यह मुख्य रूप से निम्नलिखित दो पहलुओं को दर्शाता है: ① सीएपी प्रमोटर की संरचना और एंजाइम के साथ बातचीत को बदलकर एंजाइम अणु को सही ढंग से उन्मुख करने में मदद करता है, ताकि -10 क्षेत्र के साथ संयोजन किया जा सके और -35 क्षेत्र के कार्य को प्रतिस्थापित करने की भूमिका निभाई जा सके।②CAP डीएनए में अन्य साइटों पर आरएनए पोलीमरेज़ के बंधन को भी रोक सकता है, जिससे इसके विशिष्ट प्रमोटर से जुड़ने की संभावना बढ़ जाती है।
8. एक विशिष्ट डीएनए पुनर्संयोजन प्रयोग में आमतौर पर कौन से चरण शामिल होते हैं?
एक।दाता जीव के लक्ष्य जीन (या बहिर्जात जीन) को निकालें, और एक नया पुनः संयोजक डीएनए अणु बनाने के लिए इसे एंजाइमेटिक रूप से दूसरे डीएनए अणु (क्लोनिंग वेक्टर) से जोड़ें।बी।पुनः संयोजक डीएनए अणु को प्राप्तकर्ता कोशिका में स्थानांतरित करें और इसे प्राप्तकर्ता कोशिका में प्रतिकृति बनाकर संरक्षित करें।इस प्रक्रिया को परिवर्तन कहा जाता है।सी।स्क्रीन करें और उन प्राप्तकर्ता कोशिकाओं की पहचान करें जिन्होंने पुनः संयोजक डीएनए को अवशोषित कर लिया है।डी।यह पता लगाने के लिए कि विदेशी सहायता जीन व्यक्त है या नहीं, पुनः संयोजक डीएनए युक्त कोशिकाओं का बड़े पैमाने पर संवर्धन किया जाता है।
9. जीन लाइब्रेरी का निर्माण पुनः संयोजकों की स्क्रीनिंग के लिए तीन तरीके दिए गए हैं और प्रक्रिया का संक्षेप में वर्णन किया गया है।
एंटीबायोटिक प्रतिरोध स्क्रीनिंग, प्रतिरोध की सम्मिलन निष्क्रियता, नीले-सफेद स्पॉट स्क्रीनिंग या पीसीआर स्क्रीनिंग, विभेदक स्क्रीनिंग, डीएनए जांच अधिकांश क्लोनिंग वैक्टर एंटीबायोटिक प्रतिरोध जीन (एंटी-एम्पीसिलीन, टेट्रासाइक्लिन) ले जाते हैं।जब प्लास्मिड को एस्चेरिचिया कोली में स्थानांतरित किया जाता है, तो बैक्टीरिया प्रतिरोध प्राप्त कर लेंगे, और बिना स्थानांतरण वाले बैक्टीरिया में प्रतिरोध नहीं होगा।लेकिन यह भेद नहीं कर पाता कि इसे पुनर्गठित किया गया है या नहीं।दो प्रतिरोधी जीन वाले वेक्टर में, यदि एक विदेशी डीएनए टुकड़ा जीन में डाला जाता है और जीन को निष्क्रिय कर देता है, तो सकारात्मक पुनः संयोजकों की जांच के लिए विभिन्न दवाओं वाले दो प्लेट नियंत्रण का उपयोग किया जा सकता है।उदाहरण के लिए, पीयूसी प्लास्मिड में लैक्ज़ जीन (एन्कोडिंग β-गैलेक्टोसिडेज़) होता है, जो क्रोमोजेनिक सब्सट्रेट एक्स-गैल (5-ब्रोमो-4-क्लोरो-3-इंडोल-बीटा-डी-गैलेक्टोसाइड) को विघटित करके नीला रंग उत्पन्न कर सकता है, जिससे स्ट्रेन नीला हो जाता है।जब विदेशी डीएनए डाला जाता है, तो लैकज़ जीन को व्यक्त नहीं किया जा सकता है, और तनाव सफेद होता है, ताकि पुनः संयोजक बैक्टीरिया की जांच की जा सके।
10. भ्रूण स्टेम कोशिकाओं के माध्यम से ट्रांसजेनिक जानवरों को प्राप्त करने की मूल प्रक्रिया की व्याख्या करें?
भ्रूण स्टेम कोशिकाएं (ईएस) भ्रूण के विकास के दौरान भ्रूण कोशिकाएं होती हैं, जिन्हें कृत्रिम रूप से संवर्धित और प्रवर्धित किया जा सकता है और अन्य प्रकार की कोशिकाओं में विभेदित करने का कार्य करती हैं।ईएस कोशिकाओं का संवर्धन: ब्लास्टोसिस्ट के आंतरिक कोशिका द्रव्यमान को पृथक और सुसंस्कृत किया जाता है।जब ईएस को फीडर-मुक्त परत में संवर्धित किया जाता है, तो यह विभिन्न कार्यात्मक कोशिकाओं जैसे मांसपेशी कोशिकाओं और एन कोशिकाओं में विभेदित हो जाएगा।जब फ़ाइब्रोब्लास्ट युक्त माध्यम में सुसंस्कृत किया जाता है, तो ईएस विभेदन कार्य को बनाए रखेगा।ईएस को आनुवंशिक रूप से हेरफेर किया जा सकता है, और इसके विभेदन कार्य को इसके विभेदन कार्य को प्रभावित किए बिना एकीकृत किया जा सकता है, जो यादृच्छिक एकीकरण की समस्या को हल करता है।भ्रूण स्टेम कोशिकाओं में बहिर्जात जीन का परिचय दें, फिर गर्भवती मादा चूहों के गर्भाशय में प्रत्यारोपित करें, पिल्लों में विकसित करें, और समयुग्मजी चूहों को प्राप्त करने के लिए क्रॉस करें।
