वायरल डीएनए और आरएनए अलगाव किट वायरल डीएनए और आरएनए निष्कर्षण शुद्धिकरण तैयारी किट
विशेष विवरण
50 तैयारी, 200 तैयारी
वायरल आरएनए न्यूक्लिक एसिड प्यूरीफिकेशन एक्सट्रैक्शन आइसोलेशन किट फोरजीन द्वारा विकसित स्पिन कॉलम और फॉर्मूला का उपयोग करता है, जो प्लाज्मा, सीरम, सेल-मुक्त शरीर तरल पदार्थ और सेल कल्चर सुपरनैटेंट जैसे नमूनों से उच्च शुद्धता और उच्च गुणवत्ता वाले वायरल आरएनए को कुशलतापूर्वक निकाल सकता है।किट में विशेष रूप से लीनियर एक्रिलामाइड मिलाया जाता है, जो नमूनों से छोटी मात्रा में आरएनए को आसानी से पकड़ सकता है।आरएनए-ओनली कॉलम आरएनए को कुशलतापूर्वक बांध सकता है।किट एक ही समय में बड़ी संख्या में नमूनों को संसाधित कर सकती है।
संपूर्ण किट में RNase नहीं है, इसलिए शुद्ध किया गया RNA ख़राब नहीं होगा।बफर viRW1 और बफर viRW2 यह सुनिश्चित कर सकते हैं कि प्राप्त वायरल न्यूक्लिक एसिड प्रोटीन, न्यूक्लीज या अन्य अशुद्धियों से मुक्त है, जिसका उपयोग सीधे डाउनस्ट्रीम आणविक जीव विज्ञान प्रयोगों के लिए किया जा सकता है।
किट घटक
| रैखिक एक्रिलामाइड |
| बफर डीआरएल |
| बफ़र RW1, बफ़र RW2 |
| RNase-मुक्त ddH2O |
| डीएनए/आरएनए कॉलम |
| निर्देश |
विशेषताएँ एवं लाभ
■ पूरी प्रक्रिया के दौरान कमरे के तापमान (15-25℃) पर संचालन, बर्फ स्नान और कम तापमान सेंट्रीफ्यूजेशन के बिना।
■ संपूर्ण किट RNase-मुक्त, RNA क्षरण के बारे में चिंता करने की कोई आवश्यकता नहीं।
■ उच्च न्यूक्लिक एसिड उपज: डीएनए/आरएनए-केवल कॉलम और अद्वितीय सूत्र कुशलतापूर्वक डीएनए और आरएनए को शुद्ध कर सकते हैं।
■ बड़ी नमूना प्रसंस्करण क्षमता: हर बार 200μl तक नमूने संसाधित किए जा सकते हैं।
■ तेज़ गति: संचालित करने में आसान और 20 मिनट के भीतर पूरा किया जा सकता है।
■ सुरक्षा: किसी कार्बनिक अभिकर्मक की आवश्यकता नहीं है।
■ उच्च गुणवत्ता: शुद्ध आरएनए टुकड़े उच्च शुद्धता के होते हैं, प्रोटीन और अन्य अशुद्धियों से मुक्त होते हैं, और विभिन्न डाउनस्ट्रीम प्रयोगात्मक अनुप्रयोगों को पूरा कर सकते हैं।
किट आवेदन
यह प्लाज्मा, सीरम, कोशिका-मुक्त शरीर द्रव और कोशिका संस्कृति सतह पर तैरनेवाला जैसे नमूनों में वायरल न्यूक्लिक एसिड के निष्कर्षण और शुद्धिकरण के लिए उपयुक्त है।
कार्य प्रवाह
आरेख
भंडारण और शेल्फ जीवन
■ इस किट को कमरे के तापमान (15-25℃) पर शुष्क परिस्थितियों में 24 महीने तक संग्रहीत किया जा सकता है;यदि इसे लंबे समय तक संग्रहीत करने की आवश्यकता है, तो इसे 2-8℃ में संग्रहीत किया जा सकता है।
■ लीनियर एक्रिलामाइड घोल को कमरे के तापमान पर 7 दिनों तक संग्रहीत किया जा सकता है;किट प्राप्त करने के बाद, कृपया इसे बाहर निकालें और -20°C पर संग्रहित करें।
■ बफर डीआरएल में लीनियर एक्रिलामाइड मिलाने के बाद इसे 2-8°C पर 48 घंटे तक स्टोर किया जा सकता है।कृपया तैयार घोल का उपयोग करें।
समस्या विश्लेषण मार्गदर्शिका
निम्नलिखित उन समस्याओं का विश्लेषण है जो वायरल डीएनए/आरएनए के निष्कर्षण में सामने आ सकती हैं, उम्मीद है कि यह आपके प्रयोगों के लिए सहायक होगी।इसके अलावा, ऑपरेशन निर्देशों और समस्या विश्लेषण के अलावा अन्य प्रयोगात्मक या तकनीकी समस्याओं के लिए, हमारे पास आपकी सहायता के लिए समर्पित तकनीकी सहायता है।यदि आपकी कोई आवश्यकता है, तो कृपया हमसे संपर्क करें: 028-83360257 या ई-मेल:
Tech@foregene.com.
कोई न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण या कम न्यूक्लिक एसिड उपज
आमतौर पर कई कारक होते हैं जो पुनर्प्राप्ति दक्षता को प्रभावित करते हैं, जैसे: नमूना न्यूक्लिक एसिड सामग्री, संचालन विधि, निक्षालन मात्रा, आदि।
सामान्य कारणों का विश्लेषण:
1. प्रक्रिया के दौरान बर्फ स्नान या कम तापमान (4°C) सेंट्रीफ्यूजेशन किया गया।
सुझाव: पूरी प्रक्रिया के दौरान कमरे के तापमान (15-25 डिग्री सेल्सियस) पर काम करें, बर्फ स्नान और कम तापमान सेंट्रीफ्यूजेशन न करें।
2. नमूना अनुचित तरीके से संग्रहीत किया गया था या नमूना बहुत लंबे समय तक संग्रहीत किया गया था।
सिफ़ारिश: नमूनों को -80°C पर संग्रहित करें और बार-बार जमने और पिघलने से बचें;न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण के लिए ताज़ा एकत्रित नमूनों का उपयोग करने का प्रयास करें।
3. अपर्याप्त नमूना विश्लेषण।
सिफ़ारिश: कृपया सुनिश्चित करें कि नमूना और लाइसिस कार्यशील समाधान अच्छी तरह मिश्रित हैं और कमरे के तापमान (15-25 डिग्री सेल्सियस) पर 10 मिनट के लिए रखे गए हैं।
4. एल्युएंट का गलत योग।
सुझाव: सुनिश्चित करें कि RNase-मुक्त ddH2O को शुद्धि स्तंभ झिल्ली के मध्य में बूंद-बूंद करके जोड़ा जाए, और इसे शुद्धि स्तंभ रिंग पर न गिराएं।
5. बफ़र RW2 में पूर्ण इथेनॉल की सही मात्रा नहीं जोड़ी गई थी।
सुझाव: कृपया निर्देशों का पालन करें, बफर आरडब्ल्यू2 में पूर्ण इथेनॉल की सही मात्रा जोड़ें और किट का उपयोग करने से पहले अच्छी तरह मिलाएं।
6. अनुपयुक्त नमूना मात्रा.
सुझाव: बफर डीआरएल के प्रत्येक 500μl के लिए 200μl नमूना संसाधित किया जाता है।अत्यधिक नमूना प्रसंस्करण के परिणामस्वरूप न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण उपज कम होगी।
7. अनुपयुक्त निक्षालन मात्रा या अपूर्ण निक्षालन।
सिफ़ारिश: शुद्धिकरण स्तंभ की तरल मात्रा 30-50μl है;यदि निक्षालन प्रभाव संतोषजनक नहीं है, तो पहले से गरम RNase-मुक्त ddH2O, जैसे 5-10 मिनट जोड़ने के बाद कमरे के तापमान पर समय बढ़ाने की सिफारिश की जाती है।
8. बफर RW2 से धोने के बाद इथेनॉल कॉलम पर रहता है।
सुझाव: यदि बफर आरडब्ल्यू2 के साथ सेंट्रीफ्यूजेशन के बाद 2 मिनट तक इथेनॉल रहता है, तो अवशिष्ट इथेनॉल को पूरी तरह से हटाने के लिए कॉलम को सेंट्रीफ्यूजेशन के बाद 5 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर रखा जा सकता है।
शुद्ध न्यूक्लिक एसिड का क्षरण होता है
शुद्ध न्यूक्लिक एसिड की गुणवत्ता नमूने के संरक्षण, RNase संदूषण, संचालन और अन्य कारकों से संबंधित है।सामान्य कारणों का विश्लेषण:
1. एकत्रित नमूनों को समय पर संग्रहित नहीं किया गया।
सुझाव: यदि नमूना एकत्र करने के बाद समय पर उपयोग नहीं किया जाता है, तो कृपया इसे तुरंत -80 डिग्री सेल्सियस पर कम तापमान पर संग्रहित करें।आरएनए निष्कर्षण के लिए, ताज़ा एकत्रित नमूनों का उपयोग करने का प्रयास करें।
2. नमूने एकत्र करें और बार-बार फ्रीज और पिघलाएं।
सुझाव: नमूनों के संग्रह और भंडारण के दौरान ठंड और पिघलने (एक बार से अधिक नहीं) से बचें, अन्यथा न्यूक्लिक एसिड की उपज कम हो जाएगी।
3. ऑपरेशन रूम में RNase शुरू किया जाता है या डिस्पोजेबल दस्ताने, मास्क आदि नहीं पहने जाते हैं।
सिफ़ारिश: आरएनए निष्कर्षण प्रयोग एक अलग आरएनए ऑपरेशन कक्ष में करना सबसे अच्छा है, और प्रयोग से पहले प्रयोगशाला की मेज को साफ किया जाना चाहिए।
RNase की शुरूआत के कारण होने वाले RNA क्षरण से अधिकतम सीमा तक बचने के लिए प्रयोग के दौरान डिस्पोजेबल दस्ताने और मास्क पहनें।
4. उपयोग के दौरान अभिकर्मक RNase से दूषित हो गया था।
सिफ़ारिश: संबंधित प्रयोगों के लिए एक नए वायरल डीएनए/आरएनए आइसोलेशन किट से बदलें।
5. आरएनए हेरफेर के लिए उपयोग की जाने वाली सेंट्रीफ्यूज ट्यूब और पिपेट युक्तियाँ आरएनएएस से दूषित हैं।
सुझाव: सुनिश्चित करें कि आरएनए निष्कर्षण के लिए उपयोग की जाने वाली सेंट्रीफ्यूज ट्यूब, पिपेट टिप, पिपेट आदि सभी आरएनसे-मुक्त हैं।
शुद्ध न्यूक्लिक एसिड डाउनस्ट्रीम प्रयोगों को प्रभावित करता है
शुद्धि स्तंभ द्वारा शुद्ध किए गए डीएनए और आरएनए, यदि नमक आयन और प्रोटीन सामग्री बहुत अधिक है, तो यह डाउनस्ट्रीम प्रयोगों को प्रभावित करेगा, जैसे: पीसीआर प्रवर्धन, रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन इत्यादि।
1. निक्षालित डीएनए और आरएनए में अवशिष्ट नमक आयन होते हैं।
सुझाव: सुनिश्चित करें कि पूर्ण इथेनॉल की सही मात्रा बफर आरडब्ल्यू2 में जोड़ी गई है, और ऑपरेटिंग निर्देशों में निर्दिष्ट सेंट्रीफ्यूजेशन गति पर शुद्धिकरण कॉलम को दो बार धोएं;नमक आयन संदूषण को कम करने के लिए सेंट्रीफ्यूजेशन करें।
2. निक्षालित डीएनए और आरएनए में इथेनॉल अवशेष होते हैं।
सुझाव: बफर RW2 के साथ धुलाई की पुष्टि करने के बाद, ऑपरेटिंग निर्देशों में सेंट्रीफ्यूजेशन गति पर खाली ट्यूब सेंट्रीफ्यूजेशन करें;यदि अभी भी इथेनॉल अवशेष है, तो आप खाली ट्यूब को सेंट्रीफ्यूज कर सकते हैं और फिर इथेनॉल अवशेषों को अधिकतम सीमा तक हटाने के लिए इसे 5 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर रख सकते हैं।
निर्देश पुस्तिका:
वायरल डीएनए और आरएनए आइसोलेशन किट निर्देश मैनुअल
