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सेल से कुल आरएनए आइसोलेशन किट कुल आरएनए आइसोलेशन प्यूरिफिकेशन किट सेल से

किट विवरण:

11 मिनट में विभिन्न संवर्धित कोशिकाओं से अत्यधिक शुद्ध और उच्च गुणवत्ता वाला कुल आरएनए प्राप्त किया जा सकता है।

RNase मुक्त

कमरे के तापमान पर संचालित (15-25 ℃)

डीएनए-क्लीनिंग कॉलम के साथ

उच्च आरएनए उपज

तेज़: 11 मिनट में निष्कर्षण समाप्त करें

सुरक्षा: कोई कार्बनिक रसायन नहीं

पूर्वज शक्ति


  • :
  • वास्तु की बारीकी

    उत्पाद टैग

    सामान्य प्रश्न

    विवरण

    यह किट फोरजीन द्वारा विकसित स्पिन कॉलम और फॉर्मूला का उपयोग करती है, जो 96, 24, 12 और 6-वेल प्लेट्स में संवर्धित कोशिकाओं से उच्च शुद्धता और उच्च गुणवत्ता वाले कुल आरएनए को कुशलता से निकाल सकती है।

    किट एक कुशल डीएनए-क्लीनिंग कॉलम प्रदान करता है, जो आसानी से सतह पर तैरनेवाला और सेल लाइसेट को अलग कर सकता है, जीनोमिक डीएनए को बांध सकता है और हटा सकता है।ऑपरेशन सरल और समय बचाने वाला है.

    Tवह आरएनए-ओनली कॉलम आरएनए को एक अद्वितीय सूत्र के साथ कुशलता से बांध सकता है।बड़ी संख्या में नमूनों को एक साथ संसाधित किया जा सकता है।

    किट घटक

    किट रचना आरई-03111 आरई-03114
    50 टी 200 टी
    बफर cRL1* 25 एमएल 100 एमएल
    बफर cRL2 15 एमएल 60 एमएल
    बफर RW1* 25 एमएल 100 एमएल
    बफर RW2 24 एमएल 96 एमएल
    RNase मुक्त ddH2O 10 एमएल 40 एमएल
    आरएनए-केवल कॉलम 50 200
    डीएनए-सफाई स्तंभ 50 200
    अनुदेश 1 1

    *कृपया ऑपरेशन के दौरान दस्ताने पहनें और सुरक्षात्मक उपाय करें क्योंकि बफर cRL1 और बफर RW1 में परेशान करने वाले चॉट्रोपिक लवण होते हैं।

    सुविधाएँ और लाभ

    ■ पूरी प्रक्रिया कमरे के तापमान (15-25 ℃) पर बर्फ स्नान और कम तापमान सेंट्रीफ्यूगेशन के बिना संचालित होती है।
    ■ पूरी किट RNase-मुक्त है, RNA क्षरण के बारे में चिंता करने की आवश्यकता नहीं है।
    ■ डीएनए-क्लीनिंग कॉलम विशेष रूप से डीएनए को बांधता है, ताकि किट अतिरिक्त DNase जोड़े बिना जीनोमिक डीएनए संदूषण को हटा सके।
    ■ उच्च आरएनए उपज: आरएनए-केवल कॉलम और अद्वितीय सूत्र आरएनए को कुशलतापूर्वक शुद्ध कर सकते हैं।
    ■ तेज गति: संचालित करने में आसान और 11 मिनट में पूरा किया जा सकता है।
    ■ सुरक्षा: किसी जैविक अभिकर्मक की आवश्यकता नहीं है।
    ■ उच्च गुणवत्ता: शुद्ध आरएनए उच्च शुद्धता का है, प्रोटीन और अन्य अशुद्धियों से मुक्त है, और बाद के विभिन्न प्रयोगों को पूरा कर सकता है।

    Foregene RNA अलगाव किट के लाभ

    किट आवेदन

    यह 96, 24, 12 और 6-वेल प्लेटों में संवर्धित कोशिकाओं से कुल आरएनए के निष्कर्षण और शुद्धिकरण के लिए उपयुक्त है।

    कार्य प्रवाह

    सेल कुल आरएनए

    आरेख

    सेल टोटल आरएनए आइसोलेशन किट वर्क फ्लो1

    सेल टोटल आरएनए आइसोलेशन किट के एग्रोस जेल बैटरी डायग्राम ने उपरोक्त विभिन्न कोशिकाओं की संख्या का इलाज किया, 20μl वॉल्यूम रेफरेंस, 2μl शुद्ध कुल आरएनए 1% लें।

    भंडारण और शेल्फ जीवन

    किट को 12 महीनों के लिए कमरे के तापमान (15-25 ℃) या 2-8 ℃ अधिक समय (24 महीने) के लिए संग्रहीत किया जा सकता है।

    बफर cRL1 को 2-हाइड्रॉक्सी-1-एथेनेथियोल (वैकल्पिक) जोड़ने के बाद 1 महीने के लिए 4 ℃ पर संग्रहीत किया जा सकता है।


  • पिछला:
  • अगला:

  • आरएनए निकाला नहीं जाता है या आरएनए उपज कम होती है

    अक्सर कई प्रकार के कारक होते हैं जो पुनर्प्राप्ति दक्षता को प्रभावित करते हैं, जैसे: ऊतक नमूना आरएनए सामग्री, संचालन की विधि, क्षालन मात्रा, आदि।

    1. ऑपरेशन के दौरान आइस बाथ या क्रायोजेनिक (4 डिग्री सेल्सियस) सेंट्रीफ्यूगेशन किया गया।

    सिफारिश: पूरी प्रक्रिया के दौरान कमरे के तापमान (15-25 डिग्री सेल्सियस) पर काम करें, कम तापमान पर आइस बाथ और सेंट्रीफ्यूज न करें।

    2. अनुचित नमूना संरक्षण या अत्यधिक नमूना भंडारण समय।

    सिफारिश: -80 डिग्री सेल्सियस पर नमूने स्टोर करें या तरल नाइट्रोजन में फ्रीज करें और बार-बार फ्रीज-पिघलने के उपयोग से बचें;आरएनए निष्कर्षण के लिए ताजा ऊतक या सुसंस्कृत कोशिकाओं का उपयोग करने का प्रयास करें।

    3. अपर्याप्त नमूना लिसिस।

    सिफारिश: ऊतक को समरूप बनाते समय, सुनिश्चित करें कि ऊतक पर्याप्त रूप से समरूप है और आरएनए की रिहाई की व्याख्या करने के लिए ऊतक कोशिकाओं को पर्याप्त रूप से विभाजित किया गया है।

    4. एलुएंट सही तरीके से नहीं जोड़ा गया है।

    अनुशंसा: पुष्टि करें कि RNase-मुक्त ddH2O को शुद्धिकरण स्तंभ झिल्ली के मध्य में ड्रॉपवाइज जोड़ा जाता है।

    5. बफ़र RL2 या बफ़र RW2 में पूर्ण इथेनॉल की सही मात्रा नहीं जोड़ी गई थी।

    अनुशंसा: निर्देशों का पालन करें, बफ़र RL2 और बफ़र RW2 में पूर्ण इथेनॉल की सही मात्रा जोड़ें और किट का उपयोग करने से पहले अच्छी तरह मिलाएं।

    6. ऊतक के नमूने की खुराक उचित नहीं है।

    सिफारिश: 10-20 मिलीग्राम ऊतक या (1-5) × 10 का प्रयोग करें6कोशिकाओं प्रति 500 ​​μl बफर RL1, अत्यधिक ऊतक उपयोग के परिणामस्वरूप आरएनए निष्कर्षण कम हो सकता है।

    7. अनुचित रेफरेंस वॉल्यूम या अधूरा रेफरेंस।

    सिफारिश: शोधन स्तंभ का रेफरेंस वॉल्यूम 50-200 μl है;यदि रेफरेंस प्रभाव संतोषजनक नहीं है, तो यह अनुशंसा की जाती है कि पहले से गरम RNase-मुक्त ddH मिलाने के बाद कमरे के तापमान को रखने का समय बढ़ा दिया जाए2ओ, उदाहरण के लिए 5-10 मिनट के लिए।

    8. बफर आरडब्ल्यू 2 धोने के बाद शुद्धिकरण कॉलम में इथेनॉल अवशेष है।

    सिफारिश: यदि बफर आरडब्ल्यू 2 धोने के बाद इथेनॉल अवशेष है, तो 1 मिनट के लिए खाली ट्यूब सेंट्रीफ्यूगेशन, खाली ट्यूब सेंट्रीफ्यूगेशन ऑपरेशन के लिए समय 2 मिनट तक बढ़ाया जा सकता है, या अवशिष्ट को पर्याप्त रूप से हटाने के लिए शुद्धिकरण कॉलम को 5 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर रखा जा सकता है। इथेनॉल।

    शुद्ध आरएनए का क्षरण होता है

    शुद्ध आरएनए की गुणवत्ता कारकों से संबंधित है जैसे नमूने का संरक्षण, आरएनएएस संदूषण, और हेरफेर, आदि।

    1. टिश्यू के सैंपल समय पर नहीं रखे जाते हैं।

    सिफारिश: यदि संग्रह के बाद ऊतक के नमूने या कोशिकाओं का समय पर उपयोग नहीं किया जाता है, तो तुरंत -80 डिग्री सेल्सियस या तरल नाइट्रोजन पर क्रायोसंरक्षण करें।आरएनए निकालने के लिए, जब भी संभव हो, नए लिए गए ऊतक या कोशिका के नमूने का उपयोग करें।

    2. ऊतक के नमूनों का बार-बार फ्रीज-विगलन।

    सिफारिश: ऊतक के नमूनों को संग्रहित करते समय, संरक्षण के लिए उन्हें छोटे टुकड़ों में काटना सबसे अच्छा होता है, और नमूने के बार-बार फ्रीज-विगलन और आरएनए के क्षरण से बचने के लिए उनका उपयोग करते समय टुकड़ों में से एक को हटा दें।

    3. RNase पेश किया जाता है या ऑपरेशन के दौरान डिस्पोजेबल दस्ताने, मास्क आदि नहीं पहने जाते हैं।

    सिफारिश: आरएनए निष्कर्षण प्रयोगों को अलग-अलग आरएनए हेरफेर कक्षों में सबसे अच्छा किया जाता है और प्रयोग से पहले तालिका को साफ़ कर दिया जाता है।

    प्रयोग के दौरान डिस्पोजेबल दस्ताने और मास्क पहनें ताकि आरएनए की शुरूआत के कारण होने वाले आरएनए क्षरण को कम किया जा सके।

    4. उपयोग के दौरान अभिकर्मक RNase से दूषित होते हैं।

    सिफारिश: संबंधित प्रयोगों के लिए एक नए एनिमल टोटल आरएनए आइसोलेशन किट से बदलें।

    5. आरएनए हेरफेर में उपयोग किए जाने वाले सेंट्रीफ्यूज ट्यूब, टिप्स आदि RNase से दूषित होते हैं।

    सिफारिश: पुष्टि करें कि आरएनए निष्कर्षण में उपयोग किए जाने वाले सेंट्रीफ्यूज ट्यूब, टिप्स, पिपेट आदि सभी आरएनएस-फ्री हैं।

    शुद्ध प्राप्त आरएनए डाउनस्ट्रीम प्रयोगों को प्रभावित करता है

    शुद्धिकरण स्तंभ द्वारा शुद्ध आरएनए, यदि नमक आयन, प्रोटीन सामग्री बहुत बड़ी है, तो डाउनस्ट्रीम प्रयोग को प्रभावित करेगा, जैसे: रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन, नॉर्दर्न ब्लाट एट अल।

    1. निक्षालित RNA में लवण आयन अवशेष होते हैं।

    सिफारिश: पुष्टि करें कि इथेनॉल की सही मात्रा को बफर आरडब्ल्यू 2 में जोड़ा गया है और ऑपरेशन के लिए संकेतित केन्द्रापसारक गति पर 2 शुद्धिकरण कॉलम वॉश करें;यदि कोई नमक आयन अवशेष है, तो शुद्धिकरण कॉलम को कमरे के तापमान पर 5 मिनट के लिए बफर RW2 पर छोड़ दें और नमक संदूषण को हटाने के लिए सेंट्रीफ्यूगेशन करें।

    2. एल्युशन आरएनए में इथेनॉल अवशेष।

    अनुशंसा: पुष्टि करें कि बफर RW2 धोने के बाद, ऑपरेशन के लिए संकेतित सेंट्रीफ्यूगेशन गति पर खाली ट्यूब सेंट्रीफ्यूगेशन ऑपरेशन करें, खाली ट्यूब सेंट्रीफ्यूगेशन ऑपरेशन के समय को 2 मिनट तक बढ़ाएं यदि अभी भी इथेनॉल अवशेष है, या इसे 5 के लिए कमरे के तापमान पर छोड़ दें एम

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