रोगजनक सूक्ष्मजीव वे सूक्ष्मजीव हैं जो मानव शरीर पर आक्रमण कर सकते हैं, संक्रमण और यहां तक ​​कि संक्रामक रोग या रोगजनकों का कारण बन सकते हैं।रोगज़नक़ों में बैक्टीरिया और वायरस सबसे अधिक हानिकारक हैं।

संक्रमण मानव रुग्णता और मृत्यु के मुख्य कारणों में से एक है।20वीं सदी की शुरुआत में, रोगाणुरोधी दवाओं की खोज ने आधुनिक चिकित्सा को बदल दिया, जिससे मनुष्यों को संक्रमण से लड़ने के लिए एक "हथियार" मिला, और सर्जरी, अंग प्रत्यारोपण और कैंसर का इलाज भी संभव हो गया।हालाँकि, कई प्रकार के रोगजनक हैं जो संक्रामक रोगों का कारण बनते हैं, जिनमें वायरस, बैक्टीरिया, कवक और अन्य सूक्ष्मजीव शामिल हैं।विभिन्न रोगों के निदान और उपचार में सुधार लाने और लोगों के स्वास्थ्य की रक्षा करने के लिए

स्वास्थ्य के लिए अधिक सटीक और तीव्र नैदानिक ​​परीक्षण तकनीकों की आवश्यकता है।तो सूक्ष्मजीवविज्ञानी पहचान प्रौद्योगिकियाँ क्या हैं?

01 पारंपरिक पता लगाने की विधि

रोगजनक सूक्ष्मजीवों की पारंपरिक पहचान की प्रक्रिया में, उनमें से अधिकांश को दागने, सुसंस्कृत करने की आवश्यकता होती है, और इस आधार पर जैविक पहचान की जाती है, ताकि विभिन्न प्रकार के सूक्ष्मजीवों की पहचान की जा सके, और पता लगाने का मूल्य अधिक हो।पारंपरिक पता लगाने के तरीकों में मुख्य रूप से स्मीयर माइक्रोस्कोपी, पृथक्करण संस्कृति और जैव रासायनिक प्रतिक्रिया, और ऊतक कोशिका संस्कृति शामिल हैं।

1 स्मीयर माइक्रोस्कोपी

रोगजनक सूक्ष्मजीव आकार में छोटे होते हैं और अधिकांश रंगहीन और पारभासी होते हैं।उन्हें रंगने के बाद माइक्रोस्कोप की सहायता से उनके आकार, आकार, व्यवस्था आदि का निरीक्षण किया जा सकता है।प्रत्यक्ष स्मीयर स्टेनिंग सूक्ष्म परीक्षण सरल और तेज़ है, और यह प्रारंभिक प्रारंभिक निदान के लिए अभी भी विशेष रूपों वाले उन रोगजनक माइक्रोबियल संक्रमणों पर लागू होता है, जैसे कि गोनोकोकल संक्रमण, माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस, स्पाइरोचेटल संक्रमण इत्यादि।प्रत्यक्ष फोटोमाइक्रोस्कोपिक परीक्षण की विधि तेज़ है, और इसका उपयोग विशेष रूपों वाले रोगजनकों के दृश्य निरीक्षण के लिए किया जा सकता है।इसमें विशेष यंत्रों एवं उपकरणों की आवश्यकता नहीं होती।यह अभी भी बुनियादी प्रयोगशालाओं में रोगजनक सूक्ष्मजीवों का पता लगाने का एक बहुत ही महत्वपूर्ण साधन है।

2 पृथक्करण संस्कृति और जैव रासायनिक प्रतिक्रिया

पृथक्करण संस्कृति का उपयोग मुख्य रूप से तब किया जाता है जब कई प्रकार के बैक्टीरिया होते हैं और उनमें से किसी एक को अलग करने की आवश्यकता होती है।इसका उपयोग ज्यादातर थूक, मल, रक्त, शरीर के तरल पदार्थ आदि में किया जाता है। क्योंकि बैक्टीरिया लंबे समय तक बढ़ते और बढ़ते हैं, इस परीक्षण विधि के लिए एक निश्चित समय की आवश्यकता होती है।, और इसे बैचों में संसाधित नहीं किया जा सकता है, इसलिए चिकित्सा क्षेत्र ने पारंपरिक प्रशिक्षण विधियों को बेहतर बनाने और पहचान की सटीकता में सुधार करने के लिए स्वचालित प्रशिक्षण और पहचान उपकरणों का उपयोग करके इस पर शोध करना जारी रखा है।

3 ऊतक कोशिका संवर्धन

ऊतक कोशिकाओं में मुख्य रूप से क्लैमाइडिया, वायरस और रिकेट्सिया शामिल हैं।चूंकि विभिन्न रोगजनकों में ऊतक कोशिकाओं के प्रकार अलग-अलग होते हैं, रोगजनक सूक्ष्मजीवों से ऊतकों को हटाने के बाद, जीवित कोशिकाओं को उपसंस्कृति द्वारा संवर्धित किया जाना चाहिए।कोशिका रोग संबंधी परिवर्तनों को यथासंभव कम करने के लिए खेती के लिए संवर्धित रोगजनक सूक्ष्मजीवों को ऊतक कोशिकाओं में टीका लगाया जाता है।इसके अलावा, ऊतक कोशिकाओं के संवर्धन की प्रक्रिया में, संवेदनशील जानवरों में रोगजनक सूक्ष्मजीवों को सीधे टीका लगाया जा सकता है, और फिर जानवरों के ऊतकों और अंगों में परिवर्तन के अनुसार रोगजनकों की विशेषताओं का परीक्षण किया जा सकता है।

02 आनुवंशिक परीक्षण तकनीक

दुनिया में चिकित्सा प्रौद्योगिकी के स्तर में निरंतर सुधार के साथ, आणविक जैविक पहचान तकनीक का विकास और प्रगति, जो प्रभावी ढंग से रोगजनक सूक्ष्मजीवों की पहचान कर सकती है, पारंपरिक पहचान प्रक्रिया में बाहरी रूपात्मक और शारीरिक विशेषताओं के अनुप्रयोग की वर्तमान स्थिति में भी सुधार कर सकती है, और अद्वितीय जीन का उपयोग कर सकती है। टुकड़ा अनुक्रम रोगजनक सूक्ष्मजीवों के प्रकारों की पहचान करता है, इसलिए आनुवंशिक परीक्षण तकनीक का व्यापक रूप से अपने अद्वितीय फायदे के साथ नैदानिक ​​​​चिकित्सा परीक्षण के क्षेत्र में उपयोग किया जाता है।

1 पोलीमरेज़ श्रृंखला प्रतिक्रिया (पीसीआर)

पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन, पीसीआर) एक ऐसी तकनीक है जो इन विट्रो में एक अज्ञात टुकड़े का परीक्षण करने के लिए जीन टुकड़े की एक छोटी मात्रा को निर्देशित और बढ़ाने के लिए ज्ञात ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड प्राइमरों का उपयोग करती है।क्योंकि पीसीआर परीक्षण किए जाने वाले जीन को बढ़ा सकता है, यह रोगज़नक़ संक्रमण के शुरुआती निदान के लिए विशेष रूप से उपयुक्त है, लेकिन यदि प्राइमर विशिष्ट नहीं हैं, तो यह गलत सकारात्मकता पैदा कर सकता है।पीसीआर तकनीक पिछले 20 वर्षों में तेजी से विकसित हुई है, और जीन प्रवर्धन से लेकर जीन क्लोनिंग और परिवर्तन और आनुवंशिक विश्लेषण तक इसकी विश्वसनीयता में धीरे-धीरे सुधार हुआ है।यह विधि इस महामारी में नए कोरोना वायरस का पता लगाने की मुख्य विधि भी है।

फोरजीन ने यूके, ब्राजील, दक्षिण अफ्रीका और भारत के सामान्य 2 जीन, 3 जीन और वेरिएंट, क्रमशः बी.1.1.7 वंश (यूके), बी.1.351 वंश (जेडए), बी.1.617 वंश (आईएनडी) और पी.1 वंश (बीआर) का पता लगाने के लिए डायरेक्ट पीसीआर तकनीक पर आधारित आरटी-पीसीआर किट विकसित की है।

2 जीन चिप प्रौद्योगिकी

जीन चिप तकनीक उच्च गति वाले रोबोटिक्स या इन-सीटू संश्लेषण के माध्यम से एक निश्चित क्रम या व्यवस्था में उच्च घनत्व वाले डीएनए टुकड़ों को झिल्ली और कांच की शीट जैसी ठोस सतहों से जोड़ने के लिए माइक्रोएरे तकनीक के उपयोग को संदर्भित करती है।आइसोटोप या प्रतिदीप्ति के साथ लेबल किए गए डीएनए जांच के साथ, और आधार पूरक संकरण के सिद्धांत की मदद से, जीन अभिव्यक्ति और निगरानी जैसी बड़ी संख्या में अनुसंधान तकनीकें की गई हैं।रोगजनक सूक्ष्मजीवों के निदान के लिए जीन चिप प्रौद्योगिकी का अनुप्रयोग निदान के समय को काफी कम कर सकता है।साथ ही, यह यह भी पता लगा सकता है कि रोगज़नक़ में दवा प्रतिरोध है या नहीं, कौन सी दवाएं प्रतिरोधी हैं और कौन सी दवाएं संवेदनशील हैं, ताकि नैदानिक ​​​​दवा के लिए संदर्भ प्रदान किया जा सके।हालाँकि, इस तकनीक की उत्पादन लागत अपेक्षाकृत अधिक है, और चिप पहचान की संवेदनशीलता में सुधार की आवश्यकता है।इसलिए, इस तकनीक का उपयोग अभी भी प्रयोगशाला अनुसंधान में किया जाता है और नैदानिक ​​​​अभ्यास में इसका व्यापक रूप से उपयोग नहीं किया गया है।

3 न्यूक्लिक एसिड संकरण प्रौद्योगिकी

न्यूक्लिक एसिड संकरण एक ऐसी प्रक्रिया है जिसमें रोगजनक सूक्ष्मजीवों में पूरक अनुक्रमों के साथ न्यूक्लियोटाइड के एकल स्ट्रैंड कोशिकाओं में विलीन होकर हेटेरोडुप्लेक्स बनाते हैं।संकरण के लिए अग्रणी कारक रोगजनक सूक्ष्मजीवों की पहचान करने के लिए न्यूक्लिक एसिड और जांच के बीच रासायनिक प्रतिक्रिया है।वर्तमान में, रोगजनक सूक्ष्मजीवों का पता लगाने के लिए उपयोग की जाने वाली न्यूक्लिक एसिड रीक्रॉसिंग तकनीकों में मुख्य रूप से सीटू संकरण और झिल्ली धब्बा संकरण में न्यूक्लिक एसिड शामिल हैं।सीटू संकरण में न्यूक्लिक एसिड लेबल जांच के साथ रोगज़नक़ कोशिकाओं में न्यूक्लिक एसिड के संकरण को संदर्भित करता है।झिल्ली धब्बा संकरण का अर्थ है कि प्रयोगकर्ता द्वारा रोगज़नक़ कोशिका के न्यूक्लिक एसिड को अलग करने के बाद, इसे शुद्ध किया जाता है और एक ठोस समर्थन के साथ जोड़ा जाता है, और फिर लेखांकन जांच के साथ संकरण किया जाता है।लेखांकन संकरण प्रौद्योगिकी में सुविधाजनक और तेज़ संचालन के फायदे हैं, और यह संवेदनशील और उद्देश्यपूर्ण रोगजनक सूक्ष्मजीवों के लिए उपयुक्त है।

03 सीरोलॉजिकल परीक्षण

सीरोलॉजिकल परीक्षण से रोगजनक सूक्ष्मजीवों की शीघ्र पहचान की जा सकती है।सीरोलॉजिकल परीक्षण तकनीक का मूल सिद्धांत ज्ञात रोगज़नक़ एंटीजन और एंटीबॉडी के माध्यम से रोगज़नक़ों का पता लगाना है।पारंपरिक कोशिका पृथक्करण और संस्कृति की तुलना में, सीरोलॉजिकल परीक्षण के संचालन चरण सरल हैं।आम तौर पर इस्तेमाल की जाने वाली पहचान विधियों में लेटेक्स एग्लूटिनेशन परीक्षण और एंजाइम-लिंक्ड इम्यूनोएसे तकनीक शामिल है।एंजाइम-लिंक्ड इम्यूनोएसे तकनीक के अनुप्रयोग से सीरोलॉजिकल परीक्षण की संवेदनशीलता और विशिष्टता में काफी सुधार हो सकता है।यह न केवल परीक्षण नमूने में एंटीजन का पता लगा सकता है, बल्कि एंटीबॉडी घटक का भी पता लगा सकता है।

सितंबर 2020 में, संक्रामक रोग सोसायटी ऑफ अमेरिका (आईडीएसए) ने सीओवीआईडी ​​​​-19 के निदान के लिए सीरोलॉजिकल परीक्षण के लिए दिशानिर्देश जारी किए।

04 इम्यूनोलॉजिकल परीक्षण

इम्यूनोलॉजिकल डिटेक्शन को इम्यूनोमैग्नेटिक बीड सेपरेशन तकनीक भी कहा जाता है।यह तकनीक रोगजनकों में रोगजनक और गैर-रोगजनक बैक्टीरिया को अलग कर सकती है।मूल सिद्धांत है: एकल एंटीजन या कई प्रकार के विशिष्ट रोगजनकों को अलग करने के लिए चुंबकीय मनका माइक्रोस्फीयर का उपयोग।एंटीजन एक साथ इकट्ठे होते हैं, और रोगजनक बैक्टीरिया एंटीजन शरीर और बाहरी चुंबकीय क्षेत्र की प्रतिक्रिया के माध्यम से रोगजनकों से अलग हो जाते हैं।

रोगज़नक़ का पता लगाना हॉटस्पॉट-श्वसन रोगज़नक़ का पता लगाना

फोरेगीन की "15 श्वसन प्रणाली रोगजनक बैक्टीरिया का पता लगाने वाली किट" विकासाधीन है।यह किट बलगम में न्यूक्लिक एसिड को शुद्ध करने की आवश्यकता के बिना बलगम में 15 प्रकार के रोगजनक बैक्टीरिया का पता लगा सकती है।दक्षता की दृष्टि से, यह मूल 3 से 5 दिनों को घटाकर 1.5 घंटे कर देता है।