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पीसीआर का जन्म

पीसीआर (पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन)

पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन के आविष्कार को 30 साल से अधिक समय हो गया है।30 से अधिक वर्षों से, दुनिया भर के कई विद्वानों द्वारा पूरक और सुधार जारी रखने के बाद, पीसीआर तकनीक पूरे जीवन विज्ञान क्षेत्र में सबसे व्यापक और अक्सर उपयोग की जाने वाली और सबसे महत्वपूर्ण बुनियादी अनुसंधान पद्धति बन गई है।

पारंपरिक पीसीआर प्रौद्योगिकी के व्यापक अनुप्रयोग के आधार पर विकसित टचडाउन पीसीआर, रीयल-टाइम पीसीआर, मल्टी पीसीआर इत्यादि, साथ ही नए उभरे डिजिटल पीसीआर (डिजिटल पीसीआर) ने अधिकांश वैज्ञानिक शोधकर्ताओं के अनुसंधान तरीकों को काफी समृद्ध किया है और आधुनिक जीवन विज्ञान, विशेष रूप से आणविक जीव विज्ञान की विकास प्रक्रिया को तेज कर दिया है, जिससे समग्र रूप से मानव जाति के जीवन और प्रकृति के अध्ययन में महान योगदान मिला है।

पीसीआर-सिद्धांत
पॉलीमरेज़-चेन-रिएक्शन-पीसीआर

पारंपरिक पीसीआर प्रौद्योगिकी के दोष

जटिल न्यूक्लिक एसिड पृथक्करण औरनिष्कर्षण:

★ पारंपरिक पीसीआर तकनीक: आवश्यक

★ पीसीआर व्युत्पन्न तकनीक: आवश्यक

★ डीएनए और आरएनए नमूने: बड़े अंतर, कठिन संचालन आवश्यकताएँ

★ शारीरिक खतरे: विषैले अभिकर्मक शरीर को नुकसान पहुंचाते हैं

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पारंपरिक पीसीआर तकनीक और व्युत्पन्न तकनीक में एक शर्त है-न्यूक्लिक एसिड पृथक्करण और शुद्धिकरण

किसी भी जैविक नमूने को पीसीआर प्रौद्योगिकी की आवश्यकताओं को पूरा करने वाले न्यूक्लिक एसिड नमूने प्राप्त करने के लिए जटिल और थकाऊ नमूना प्रसंस्करण की एक श्रृंखला से गुजरना पड़ता है।

डीएनए और आरएनए का पृथक्करण और निष्कर्षण हमेशा से एक बुनियादी कार्य रहा है जिसे प्रासंगिक वैज्ञानिक शोधकर्ताओं को हर दिन दोहराने की आवश्यकता है।

नमूनों के बीच भारी अंतर के कारण, डीएनए और आरएनए की पृथक्करण और निष्कर्षण प्रक्रियाएं भी बहुत भिन्न होती हैं।इस कार्य के लिए ऑपरेटरों को उच्च स्तर की तकनीकी दक्षता की आवश्यकता होती है।पारंपरिक पृथक्करण और निष्कर्षण तकनीकों के लिए कुछ अत्यधिक जहरीले रासायनिक अभिकर्मकों के साथ दीर्घकालिक संपर्क की आवश्यकता होती है।इससे ऑपरेटर के शरीर को अपरिवर्तनीय क्षति होगी, और यहां तक ​​कि प्रयोग के दौरान प्रत्यक्ष क्षति भी होगी।

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वहीं, जिनके पास अध्ययन के लिए बड़ी संख्या में नमूने हैं, उनके लिए न्यूक्लिक एसिड को अलग करना और निकालना एक श्रम-गहन कार्य है।

बाज़ार में न्यूक्लिक एसिड अलगाव और निष्कर्षण किट अब परिपक्व हो गए हैं और कई ब्रांड हैं, लेकिन वे लगभग समान हैं।चाहे वह सिलिका जेल मेम्ब्रेन कॉलम सेंट्रीफ्यूगल किट हो या चुंबकीय मनका विधि किट, इसमें बहुत समय लगता है और यह महंगा है।किट की लागत के अलावा, प्रयोगशाला उपकरणों की भी विशेष आवश्यकताएं हैं।चुंबकीय मनका विधि में उपयोग किया जाने वाला स्वचालित कार्य केंद्र एक बहुत ही विशिष्ट बड़े पैमाने पर उच्च मूल्य वाला उपकरण है, जो प्रयोगशाला के लिए एक बड़ा खर्च है।

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सारांश

पीसीआर प्रयोगों के संचालन से पहले, नमूनों का पूर्व-उपचार शोधकर्ताओं के लिए एक अपरिहार्य और हमेशा सिरदर्द है।इस समस्या को कैसे हल किया जाए और क्या न्यूक्लिक एसिड के पृथक्करण और निष्कर्षण के बिना पीसीआर प्रयोग किए जा सकते हैं, यह हमेशा अधिकांश वैज्ञानिक शोधकर्ताओं और नैदानिक ​​​​प्रयोगशाला कर्मियों की सोच रही है।

Foregene का समाधान

डायरेक्ट पीसीआर तकनीक और संबंधित किटों पर वर्षों के श्रमसाध्य शोध के बाद, फोर्जिन ने कई बाधाओं को सफलतापूर्वक तोड़ दिया और मजबूत प्रतिरोध और अनुकूलनशीलता के साथ कई प्रकार के विभिन्न नमूनों के लिए सफलतापूर्वक प्रत्यक्ष पीसीआर हासिल किया, जिससे शोधकर्ताओं को न्यूक्लिक एसिड के बोझिल और खतरनाक पृथक्करण और निष्कर्षण से छुटकारा मिल गया।इससे सभी की श्रम तीव्रता बहुत कम हो जाएगी, प्रयोग प्रक्रिया में तेजी आएगी और वैज्ञानिक अनुसंधान और परीक्षण लागत बच जाएगी।

डायरेक्टपीसीआर के बारे में फोर्जिन की समझ और ज्ञान

सबसे पहले, डायरेक्टपीसीआर तकनीक विभिन्न जैविक नमूना ऊतकों के लिए एक प्रत्यक्ष पीसीआर तकनीक है।इस तकनीकी स्थिति के तहत, न्यूक्लिक एसिड को अलग करने और निकालने की कोई आवश्यकता नहीं है, और ऊतक का नमूना सीधे वस्तु के रूप में उपयोग किया जाता है, और पीसीआर प्रतिक्रिया के लिए लक्ष्य जीन प्राइमर जोड़े जाते हैं।

दूसरा, डायरेक्टपीसीआर तकनीक न केवल एक पारंपरिक डीएनए टेम्पलेट प्रवर्धन तकनीक है, बल्कि इसमें आरएनए टेम्पलेट रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन पीसीआर भी शामिल है।

तीसरा, डायरेक्टपीसीआर तकनीक न केवल सीधे ऊतक के नमूनों पर नियमित गुणात्मक पीसीआर प्रतिक्रियाएं करती है, बल्कि इसमें वास्तविक समय क्यूपीसीआर प्रतिक्रियाएं भी शामिल होती हैं, जिसके लिए प्रतिक्रिया प्रणाली में पृष्ठभूमि प्रतिदीप्ति हस्तक्षेप का विरोध करने और अंतर्जात प्रतिदीप्ति शमन करने वालों को रोकने की एक मजबूत क्षमता की आवश्यकता होती है।

चौथा, डायरेक्टपीसीआर तकनीक द्वारा लक्षित ऊतक के नमूनों को केवल न्यूक्लिक एसिड टेम्पलेट जारी करने की आवश्यकता होती है और प्रोटीन, पॉलीसेकेराइड, नमक आयन आदि को नहीं हटाते हैं जो पीसीआर प्रतिक्रिया में हस्तक्षेप करते हैं।इसके लिए प्रतिक्रिया प्रणाली में उत्कृष्ट एंटी-रिवर्सेबिलिटी और अनुकूलनशीलता के लिए न्यूक्लिक एसिड पोलीमरेज़ और पीसीआर मिक्स की आवश्यकता होती है, और यह जटिल परिस्थितियों में एंजाइम गतिविधि और प्रतिकृति सटीकता सुनिश्चित कर सकता है।

पांचवां, डायरेक्टपीसीआर तकनीक द्वारा लक्षित ऊतक के नमूनों को किसी भी न्यूक्लिक एसिड संवर्धन उपचार के अधीन नहीं किया गया है, और टेम्पलेट की मात्रा बहुत छोटी है, जिसके लिए प्रतिक्रिया प्रणाली की अत्यधिक उच्च संवेदनशीलता और प्रवर्धन दक्षता की आवश्यकता होती है।

निष्कर्ष

डायरेक्टपीसीआर तकनीक पीसीआर तकनीक के जन्म के बाद से पिछले 30 वर्षों में सबसे महत्वपूर्ण तकनीकी विकास और नवाचारों में से एक है।फोर्जिन इस प्रौद्योगिकी का अग्रणी और प्रर्वतक है और रहेगा।

डायरेक्टपीसीआर तकनीक की अनुप्रयोग संभावना बहुत व्यापक है।इस तकनीक के निरंतर सुधार और प्रचार से निश्चित रूप से वैज्ञानिक अनुसंधान और निरीक्षण कार्य में विध्वंसक परिवर्तन आएंगे।यह एक पीसीआर प्रौद्योगिकी क्रांति है।


पोस्ट करने का समय: फरवरी-21-2017