एसओपी सिस्टर्म का निर्माण

प्रयोग कर्मियों के व्यवहार को मानकीकृत करने के लिए पीसीआर प्रयोग एसओपी स्थापित करें।

प्रयोगकर्ता परिचालन प्रक्रियाओं का सख्ती से पालन करते हैं, और मानवीय कारकों के कारण होने वाले पीसीआर प्रदूषण को कम करते हैं या ऑपरेशन में प्रदूषण की घटना को रोकते हैं।इसके अलावा, प्रयोगकर्ता के पास संबंधित पेशेवर ज्ञान और कौशल होना चाहिए, जिसमें संबंधित उपकरणों के संचालन में दक्षता, संपूर्ण कार्य प्रक्रिया को स्पष्ट करना, संदूषण के उपचार के तरीकों और प्रयोगशाला गुणवत्ता नियंत्रण विधियों में महारत हासिल करना और परीक्षण परिणामों की सही व्याख्या करने में सक्षम होना शामिल है।

मानक पीसीआर प्रयोगशाला का निर्माण

पीसीआर प्रयोगशाला को सैद्धांतिक रूप से चार क्षेत्रों में विभाजित किया गया है, अर्थात् अभिकर्मक तैयारी क्षेत्र, नमूना प्रसंस्करण क्षेत्र, प्रवर्धन क्षेत्र और प्रवर्धन उत्पाद विश्लेषण क्षेत्र।पहले दो क्षेत्र प्रवर्धन-पूर्व क्षेत्र हैं, और अंतिम दो क्षेत्र प्रवर्धन-पश्चात क्षेत्र हैं।पूर्व-प्रवर्धन क्षेत्र और बाद-प्रवर्धन क्षेत्र को सख्ती से अलग किया जाना चाहिए।प्रायोगिक सामग्री, अभिकर्मक, रिकॉर्डिंग पेपर, पेन, सफाई सामग्री आदि केवल पूर्व-प्रवर्धन क्षेत्र से प्रवर्धन के बाद के क्षेत्र में प्रवाहित हो सकते हैं, अर्थात अभिकर्मक तैयारी क्षेत्र, नमूना प्रसंस्करण क्षेत्र, प्रवर्धन क्षेत्र और प्रवर्धन उत्पाद विश्लेषण क्षेत्र से, और विपरीत दिशा में प्रवाहित नहीं होना चाहिए।प्रयोगशाला में वायु प्रवाह भी पूर्व-प्रवर्धन क्षेत्र से प्रवर्धन-पश्चात क्षेत्र की ओर प्रवाहित होना चाहिए, न कि विपरीत दिशा में।

प्रायोगिक चरण कम करें

यदि प्रयोगशाला केवल पीसीआर का पता लगाने और पहचान करती है, तो पारंपरिक पीसीआर के बजाय फ्लोरोसेंट मात्रात्मक पीसीआर का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है।

प्रतिदीप्ति मात्रात्मक पीसीआर पहचान परिणामों को फ्लोरोसेंट संकेतों द्वारा एकत्र और विश्लेषण किया जा सकता है, इसलिए प्रतिक्रिया के बाद वैद्युतकणसंचलन के लिए ढक्कन खोलने की आवश्यकता नहीं है, जो एरोसोल बनाने के लिए प्रतिक्रिया उत्पादों के रिसाव के कारण होने वाले पीसीआर उत्पादों के संदूषण से बचाता है।यदि आप जेल वैद्युतकणसंचलन के लोडिंग चरण के दौरान कैप के खुलने की संख्या बढ़ाते हैं, तो एयरोसोल संदूषण होने की संभावना है।मात्रात्मक पीसीआर के अनुप्रयोग को बढ़ावा देने और धीरे-धीरे गुणात्मक पीसीआर को प्रतिस्थापित करने की सिफारिश की गई है।

यूएनजी प्रदूषण रोधी प्रणाली अपनाएं

पीसीआर प्रतिक्रिया के लिए यूएनजी एंटी-पीसीआर उत्पाद संदूषण प्रणाली का उपयोग किया जाता है।

सिस्टम dTTP के बजाय dUTP का उपयोग करता है।पीसीआर प्रतिक्रिया के बाद, सभी पीसीआर उत्पादों (डीएनए टुकड़े) को डीयूटीपी के साथ शामिल किया जाता है;पीसीआर प्रतिक्रिया के अगले दौर में, सिस्टम में जोड़े गए यूएनजी एंजाइम को पीसीआर से पहले 5 मिनट के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन किया जाता है, जो विशिष्ट रूप से डीयूटीपी युक्त सभी डीएनए टुकड़ों को डीग्रेड कर सकता है, और फिर पीसीआर प्रतिक्रिया कर सकता है।यह पीसीआर उत्पादों के कारण होने वाले एयरोसोल संदूषण को पूरी तरह से हटा सकता है।प्रभाव नीचे चित्र में दिखाया गया है:

नोट: प्रत्यक्ष पीसीआर श्रृंखला के लिए, आप एफजे बायोटेक के एंटी-पीसीआर उत्पाद प्रदूषण प्रणाली की श्रृंखला के उत्पाद चुन सकते हैं

सुझाव देना

बड़े पैमाने पर जीनोटाइपिंग परीक्षण करने वाली प्रयोगशालाओं के लिए, उचित प्रयोगशालाओं के निर्माण के अलावा अभिकर्मकों के परीक्षण के लिए यूएनजी एंटी-पीसीआर उत्पाद संदूषण प्रणाली का उपयोग करने की दृढ़ता से अनुशंसा की जाती है।

अनुस्मारक: इस प्रणाली का उपयोग पहले से ही उत्पन्न पीसीआर उत्पाद संदूषण को दूर नहीं कर सकता है।इसलिए, प्रासंगिक परीक्षण की शुरुआत में यूएनजी प्रणाली का उपयोग किया जाना चाहिए, और पीसीआर प्रवर्धन के लिए हमेशा यूएनजी प्रणाली का उपयोग किया जाना चाहिए, ताकि पीसीआर उत्पादों के संदूषण को रोका जा सके।सकारात्मक झूठी।

बड़े पैमाने पर परीक्षण करते समय फोर्ज बायोटेक की डायरेक्ट पीसीआर-यूएनजी प्रणाली का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है, जैसे: प्लांट लीफ डायरेक्ट पीसीआर किट-यूएनजी;

प्लांट सीड डायरेक्ट पीसीआर किट-यूएनजी；

पशु ऊतक डायरेक्ट पीसीआर किट-यूएनजी；

माउस टेल डायरेक्ट पीसीआर किट-यूएनजी；

ज़ेबरा फिश डायरेक्ट पीसीआर किट-यूएनजी。

फोरजीन की किटों की यह श्रृंखला न केवल तेजी से और बड़े पैमाने पर पीसीआर का पता लगा सकती है, बल्कि पीसीआर उत्पाद संदूषण को प्रभावी ढंग से रोक और नियंत्रित भी कर सकती है।