न्यूक्लिक एसिड परीक्षण प्रयोगशालाओं में पीसीआर विधियां और न्यूक्लिक एसिड एरोसोल संदूषण एक सिक्के के दो पहलू की तरह हैं।हम केवल यह चुन सकते हैं कि यह हमारे पास है या नहीं, लेकिन हम यह नहीं चुन सकते कि हम इसे चाहें या इसे खर्च करें।

1. डीएनए रिमूवर की स्क्रीनिंग

न्यूक्लिक एसिड एरोसोल संदूषण के स्थानिक निष्कासन को प्राप्त करने के लिए, सबसे पहले डीएनए रिमूवर की जांच करना आवश्यक है जो तरल अवस्था में न्यूक्लिक एसिड को हटा सकते हैं।क्योंकि ऐसे बहुत से डीएनए रिमूवर नहीं हैं जो वास्तव में काम करते हों।प्रायोगिक विधि के लिए, कृपया देखें: डीएनए रिमूवर प्रयोगशाला का "गुप्त कोना" नहीं हो सकता!

इस प्रयोग में, डिजिटल पीसीआर द्वारा निर्धारित एएसएफवी प्लास्मिड और डीएनए रिमूवर की 100 प्रतियां/μL (सीटी लगभग 31) को समान मात्रा में मिश्रित किया गया, और फिर क्रमशः 10 मिनट, 20 मिनट और 30 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर प्रतिक्रिया की गई।न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण के बाद, क्यूपीसीआर प्रवर्धन किया गया।प्लास्मिड और पानी के साथ मिश्रित एक सकारात्मक नियंत्रण की तुलना की गई।चूँकि प्रयोग एक ही समय में पूरा नहीं हुआ था, इसलिए परिणामों के बीच एक निश्चित विचलन हो सकता है, लेकिन यह प्रयोग के निष्कर्ष को प्रभावित नहीं करता है।अब तक, मैंने 10 वाणिज्यिक डीएनए रिमूवर उत्पादों का मूल्यांकन किया है।केवल नंबर 1, नंबर 6 और नंबर 8 उत्पाद तरल अवस्था में प्लास्मिड डीएनए को प्रभावी ढंग से ख़राब कर सकते हैं।अन्य उत्पादों का लगभग कोई प्रभाव नहीं पड़ता है।

तालिका 1 व्यावसायिक रूप से उपलब्ध डीएनए रिमूवर का न्यूक्लिक एसिड हटाने का प्रभाव

2. आमतौर पर इस्तेमाल होने वाले कीटाणुनाशकों का डीएनए हटाने का प्रभाव प्रयोग

1. आमतौर पर इस्तेमाल होने वाले कीटाणुनाशकों की स्क्रीनिंग

आमतौर पर प्रयोगशालाओं में कई प्रकार के कीटाणुनाशकों का उपयोग किया जाता है: एल्डिहाइड, फिनोल, अल्कोहल, चतुर्धातुक अमोनियम लवण, पेरोक्साइड, क्लोरीन की तैयारी, और एसिड और क्षार।सूक्ष्मजीवों पर इन कीटाणुनाशकों के कीटाणुशोधन प्रभावों को प्रयोगों द्वारा पूरी तरह से सत्यापित किया गया है, लेकिन न्यूक्लिक एसिड के क्षरण प्रभाव पर कोई पर्याप्त प्रयोगात्मक डेटा नहीं है।न्यूक्लिक एसिड परीक्षण प्रयोगशालाओं को एक ऐसे कीटाणुनाशक की आवश्यकता होती है जो न केवल सूक्ष्मजीवों पर अच्छा कीटाणुशोधन प्रभाव डालता है, बल्कि डीएनए को भी ख़राब कर सकता है।परीक्षण के नतीजे बताते हैं कि 84 कीटाणुनाशक और ट्राइक्लोरोइसोसायन्यूरिक एसिड और 1 एम हाइड्रोक्लोरिक एसिड की केवल दो क्लोरीन तैयारी आवश्यकताओं को पूरा करती हैं।चूंकि 1 एम हाइड्रोक्लोरिक एसिड अत्यधिक संक्षारक है, इसलिए यह सिफारिश की जाती है कि न्यूक्लिक एसिड परीक्षण प्रयोगशालाओं में अपशिष्ट निपटान के रूप में क्लोरीन की तैयारी का उपयोग किया जाए।हालाँकि, क्लोरीन की तैयारी धातुओं के लिए संक्षारक होती है और इसका उपयोग उपकरणों और उपकरणों के कीटाणुशोधन के लिए नहीं किया जा सकता है।

तालिका 2 विभिन्न प्रकार के कीटाणुनाशकों के डीएनए हटाने के प्रभाव

2. क्लोरीन तैयारियों की न्यूनतम प्रभावी सांद्रता

क्लोरीन-आधारित कीटाणुनाशकों में एक मजबूत डीएनए क्षरण प्रभाव होता है, लेकिन उनकी धातु संक्षारकता और जलन के कारण, उनका उपयोग फर्श, गैर-धातु काउंटरटॉप्स, भिगोने वाली युक्तियों, सेंट्रीफ्यूज ट्यूब और अन्य परीक्षण वस्तुओं को साफ करने के लिए किया जा सकता है।

"न्यू कोरोनरी निमोनिया महामारी कीटाणुशोधन तकनीकी दिशानिर्देश" के अनुसार: प्रदूषक (मरीजों का रक्त, स्राव और उल्टी) उपलब्ध क्लोरीन 5g/L-10g/L क्लोरीन युक्त कीटाणुनाशक;फर्श, दीवारों और वस्तुओं की सतहों पर उपलब्ध क्लोरीन 1 ग्राम/लीटर क्लोरीन कीटाणुनाशक का उपयोग करें: कपड़े, बिस्तर और अन्य वस्त्रों को पहले 0.5 ग्राम/लीटर उपलब्ध क्लोरीन के साथ क्लोरीन कीटाणुनाशक में 30 मिनट के लिए भिगोया जाता है, और फिर हमेशा की तरह साफ किया जाता है।

तालिका 3 क्लोरीन कीटाणुनाशक की विभिन्न सांद्रता का डीएनए हटाने का प्रभाव

परीक्षण के परिणाम बताते हैं कि: जब प्रभावी क्लोरीन सांद्रता 1.2 ग्राम/लीटर से अधिक या उसके बराबर होती है, तो क्लोरीन युक्त कीटाणुनाशक 5 मिनट के लिए उपयोग किए जाने पर 100 प्रतियां/μL प्लास्मिड को पूरी तरह से नष्ट कर सकता है।10 मिनट तक कार्य करने पर, 0.6 ग्राम/लीटर से अधिक या उसके बराबर प्रभावी क्लोरीन सांद्रता वाला 84 कीटाणुनाशक प्लास्मिड की 100 प्रतियां/μL को पूरी तरह से ख़राब कर सकता है।

3. न्यूक्लिक एसिड एरोसोल द्वारा प्रदूषित वायु हटाने का प्रयोग

न्यूक्लिक एसिड एरोसोल से प्रदूषित हवा को कैसे साफ करें?अधिकांश विचार एरोसोल-दूषित वातावरण बनाने और फिर उसे साफ़ करने, या संदूषण के बाद न्यूक्लिक एसिड को साफ़ करने के होते हैं।मेरे लिए, एक ऐसा प्रयोग जिसे दोहराया नहीं जा सकता और प्रयोग के परिणामों का मात्रात्मक विश्लेषण नहीं किया जा सकता, अर्थहीन है, इसलिए मैंने कीटाणुनाशक वायु कीटाणुशोधन के कुछ तरीके उधार लिए।"GB27948-2020 वायु कीटाणुनाशकों के लिए सामान्य आवश्यकताएँ" और "कीटाणुशोधन तकनीकी विशिष्टताएँ" देखें

1. परीक्षण सामग्री

1.1 डीएनए रिमूवर: इस प्रयोग में, तालिका 1 में दो व्यावसायिक रूप से उपलब्ध डीएनए रिमूवर 6 और 8 का चयन किया गया।

1.2 टेस्ट प्लास्मिड: यह ध्यान में रखते हुए कि अधिकांश प्रयोगशाला प्रदूषण का सीटी मान 30 से अधिक होगा, इस बार उपयोग किए गए एएसएफवी जीन प्लास्मिड की एकाग्रता लगभग 100 प्रतियां/μL है, और फ्लोरोसेंट मात्रात्मक पीसीआर सीटी लगभग 31.07 है।प्लास्मिड को फ्लॉकिंग कॉटन स्वाब में डालें और हवा में सुखाएँ।

1.3 परीक्षण उपकरण: बिलिंगकेहान केवीबीओएक्स कीटाणुशोधन उपकरण, जो शेन्ज़ेन रुनलियन पर्यावरण प्रौद्योगिकी कंपनी लिमिटेड द्वारा समर्थित है, में हाइड्रोजन पेरोक्साइड कीटाणुनाशक के साथ उत्कृष्ट वायु कीटाणुशोधन प्रदर्शन है, और प्रभावी ढंग से बीजाणुओं और अन्य सूक्ष्मजीवों को मार सकता है।

1.4 परीक्षण स्थान: लगभग 0.1 घन मीटर की एक बंद स्थानांतरण विंडो।

2. परीक्षण विधि

कीटाणुशोधन मशीन पर सेट कीटाणुनाशक की मात्रा 10ml है, और सांद्रता 100ml/m3 है, जो "GB27948-2020 वायु कीटाणुशोधक के लिए सामान्य आवश्यकताएं" से बहुत अधिक है: एयरोसोल स्प्रे कीटाणुशोधन का उपयोग करते समय, कीटाणुनाशक की मात्रा ≤10 ml/m3 होनी चाहिए