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एमआरएनए वैक्सीन क्या है?

एमआरएनए वैक्सीन इन विट्रो में प्रासंगिक संशोधनों के बाद प्रोटीन एंटीजन को व्यक्त और उत्पादित करने के लिए आरएनए को शरीर की कोशिकाओं में स्थानांतरित करता है, जिससे शरीर एंटीजन के खिलाफ प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया उत्पन्न करता है, जिससे शरीर की प्रतिरक्षा क्षमता का विस्तार होता है।[1,3].

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चित्र 1: एमआरएनए वैक्सीन के सीधे इंजेक्शन के प्रभाव का योजनाबद्ध आरेख [2]

एमआरएनए टीकों का वर्गीकरण

एमआरएनए टीके दो प्रकारों में विभाजित हैं:अप्रतिकृतिएमआरएनए औरस्व-प्रवर्धितएमआरएनए: स्व-प्रवर्धित एमआरएनए न केवल लक्ष्य एंटीजन को एनकोड करता है, बल्कि प्रतिकृति को भी एनकोड करता है जो इंट्रासेल्युलर आरएनए प्रवर्धन और प्रोटीन अभिव्यक्ति तंत्र को सक्षम बनाता है।गैर-प्रतिकृति एमआरएनए टीके केवल लक्ष्य एंटीजन को एनकोड करते हैं और इसमें 5' और 3' अनअनुवादित क्षेत्र (यूटीआर) होते हैं।वे अनुकूलनशीलता और जन्मजात प्रतिरक्षा की व्यापक उत्तेजना प्रदान करते हैं, अर्थात् सीटू एंटीजन अभिव्यक्ति और खतरे के संकेत संचरण में, और निम्नलिखित अनुप्रयोग हैं विशेषताएं[2,3]

● अनुकूलनशीलता और जन्मजात प्रतिरक्षा की व्यापक उत्तेजना प्रदान कर सकता है, अर्थात् सीटू एंटीजन अभिव्यक्ति और खतरे के संकेत संचरण में

●ह्यूमरल और सेलुलर इफ़ेक्टर्स और प्रतिरक्षा स्मृति सहित एक "संतुलित" प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया उत्पन्न कर सकता है

●वैक्सीन निर्माण की जटिलता को बढ़ाए बिना विभिन्न एंटीजन को जोड़ सकते हैं

●बार-बार टीकाकरण के माध्यम से प्रतिरक्षा क्षमता में निरंतर सुधार प्राप्त किया जा सकता है, और वाहक में कोई प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया नहीं होती है या बहुत कम होती है

●हीट स्थिर एमआरएनए टीके टीकों के परिवहन और भंडारण को सरल बना सकते हैं

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चित्र 2: एमआरएनए वैक्सीन और उसके एंटीजन अभिव्यक्ति तंत्र का योजनाबद्ध आरेख [4]

एमआरएनए टीकों की विशेषताएं

पारंपरिक टीकों की तुलना में, एमआरएनए टीकों में सरल उत्पादन प्रक्रियाएं, तेज विकास गति, सेल कल्चर की कोई आवश्यकता नहीं और कम लागत होती है।डीएनए टीकों की तुलना में, एमआरएनए टीकों को नाभिक में प्रवेश करने की आवश्यकता नहीं होती है और मेजबान जीनोम में एकीकरण का कोई जोखिम नहीं होता है।आधे जीवन को संशोधन द्वारा समायोजित किया जा सकता है।

तालिका 1: एमआरएनए टीकों के फायदे और नुकसान

 

फ़ायदा

कमी

एमआरएनए वैक्सीन

तीव्र अनुसंधान और विकास, वैक्सीन उत्पादन में केवल 40 दिन लगते हैं

अनावश्यक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को ट्रिगर करें

 

शारीरिक परिस्थितियों में एमआरएनए अस्थिरता, आसानी से नष्ट हो जाती है

संभावित चिकित्सीय उत्परिवर्तन से बचने के लिए जीनोम में एकीकृत नहीं किया जाएगा

 

किसी भी परमाणु स्थानीयकरण संकेत, प्रतिलेखन की कोई आवश्यकता नहीं है

सुरक्षा परमाणु की प्रभावशीलता को सत्यापित किया जाना बाकी है

 

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चित्र 3: एमआरएनए वैक्सीन उत्पादन और तैयारी का प्रवाह चार्ट [4]

फोरजीन वायरल आरएनए आइसोलेशन किट

किट

आरटी-क्यूपीसीआर आसान (एक कदम)

एक

एमआरएनए टीकों की तैयारी के लिए बेहतर रणनीतियाँ

एमआरएनए की खराब स्थिरता, ऊतकों में न्यूक्लिअस द्वारा आसान गिरावट, कम कोशिका प्रवेश दक्षता और कम अनुवाद दक्षता के कारण, ये दोष एमआरएनए टीकों के अनुप्रयोग को सीमित करते हैं।अनुवाद दक्षता भी बहुत महत्वपूर्ण भूमिका निभाती है।डिलीवरी वाहनों को वायरल वैक्टर और गैर-वायरल वैक्टर (लिपोसोम, गैर-लिपोसोम, वायरस, नैनोकण, आदि सहित) में विभाजित किया जा सकता है।इसलिए, प्रासंगिक सुधार उपायों की आवश्यकता है।एमआरएनए तैयारी के लिए औषधीय सुधार रणनीति निम्नलिखित है[2]

1 एमआरएनए को स्थिर करने और यूकेरियोटिक अनुवाद दीक्षा कारक 4ई (ईआईएफ4ई) से जुड़कर प्रोटीन अनुवाद को बढ़ाने के लिए कैप एनालॉग्स को संश्लेषित करें या कैपिंग एंजाइमों का उपयोग करें।

2 एमआरएनए को स्थिर करने और प्रोटीन अनुवाद को बढ़ाने के लिए 5′-अनट्रांसलेटेड क्षेत्र (यूटीआर) और 3′-यूटीआर में तत्वों को समायोजित करें

3 पॉली(ए) टेल जोड़ने से एमआरएनए स्थिर हो सकता है और प्रोटीन अनुवाद बढ़ सकता है

4 जन्मजात प्रतिरक्षा सक्रियण को कम करने और अनुवाद को बढ़ाने के लिए संशोधित न्यूक्लियोसाइड

5 RNase III और तेज़ प्रोटीन तरल क्रोमैटोग्राफी (FPLC) शुद्धि के साथ उपचार प्रतिरक्षा सक्रियण को कम कर सकता है और अनुवाद को बढ़ा सकता है

6 अनुवाद बढ़ाने के लिए अनुक्रमों या कोडन को अनुकूलित करें

7 अनुवाद दीक्षा कारकों की सह-डिलीवरी और अनुवाद और इम्यूनोजेनेसिटी को बदलने के लिए अन्य तरीके

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चित्र 4: इन विट्रो ट्रांसक्रिप्शन (आईवीटी) एमआरएनए उत्पादन और असेंबली प्रक्रिया [5]

प्लास्मिड डीएनए की बड़े पैमाने पर तैयारी

प्लास्मिड डीएनए शुद्धिकरण मुख्य रूप से आरएनए, ओपन-सर्कल डीएनए एंडोटॉक्सिन, मेजबान प्रोटीन और मेजबान न्यूक्लिक एसिड जैसे दूषित पदार्थों को हटा देता है, और आमतौर पर पुनः संयोजक प्लास्मिड को ई. कोलाई में बदल देता है।ई. कोलाई उच्च-घनत्व किण्वन से गुजरता है, फिर ठोस-तरल पृथक्करण और ई. कोली का संग्रह होता है।ई. कोली को फिर क्षारीय लसीका, केन्द्रापसारक ठोस-तरल पृथक्करण और लसीका के बाद माइक्रोफिल्ट्रेशन स्पष्टीकरण, स्पष्टीकरण के बाद अल्ट्राफिल्ट्रेशन और एकाग्रता, और फिर क्रोमैटोग्राफिक शुद्धिकरण के अधीन किया जाता है।

सीएसए
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प्लास्मिड डीएनए का शुद्धिकरण:

ज़ाज़

फोरजीन जनरल प्लास्मिड मिनी किट

1】苗鹤凡, 郭勇, ठीक है.एमआरएनए疫苗研究进展及挑战[जे]।免疫学杂志, 2016(05):446-449।

2पारडी एन, होगन एमजे, पोर्टर एफडब्ल्यू, एट अल।एमआरएनए टीके - वैक्सीनोलॉजी में एक नया युग[जे]।नेचर रिव्यूज़ ड्रग डिस्कवरी, 2018।

3क्रैम्प्स टी., एल्बर्स के. (2017) आरएनए टीकों का परिचय।इन: क्रैम्प्स टी., एल्बर्स के. (संस्करण) आरएनए टीके।मेथड्स इन मॉलिक्यूलर बायोलॉजी, खंड 1499। हुमाना प्रेस, न्यूयॉर्क, एनवाई।

4मारुग्गी जी, झांग सी, ली जे, एट अल।संक्रामक रोगों को नियंत्रित करने के लिए वैक्सीन विकास के लिए एक परिवर्तनकारी प्रौद्योगिकी के रूप में एमआरएनए।आणविक चिकित्सा, 2019।

5सर्जियो लिनारेस-फर्नांडीज, सेलीन लैक्रोइक्स, जन्मजात/अनुकूली प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को संतुलित करने के लिए एमआरएनए वैक्सीन की सिलाई, आणविक चिकित्सा में रुझान, खंड 26, अंक 3,2020, पृष्ठ 311-323।


पोस्ट करने का समय: अगस्त-05-2021