एंटीबॉडीज़, जिन्हें इम्युनोग्लोबुलिन (आईजी) भी कहा जाता है, ग्लाइकोप्रोटीन हैं जो विशेष रूप से एंटीजन से बंधते हैं।
 
पारंपरिक एंटीबॉडी तैयारी जानवरों का टीकाकरण और एंटीसीरम एकत्र करके तैयार की जाती है।इसलिए, एंटीसीरम में आमतौर पर सीरम में अन्य असंबंधित एंटीजन और अन्य प्रोटीन घटकों के खिलाफ एंटीबॉडी होते हैं।सामान्य एंटीजन अणुओं में अधिकतर कई अलग-अलग एपिटोप होते हैं, इसलिए पारंपरिक एंटीबॉडी भी कई अलग-अलग एपिटोप के खिलाफ एंटीबॉडी का मिश्रण होते हैं।यहां तक ​​कि एक ही एपिटोप के खिलाफ निर्देशित पारंपरिक सीरम एंटीबॉडी अभी भी विभिन्न बी सेल क्लोन द्वारा उत्पादित विषम एंटीबॉडी से बने होते हैं।इसलिए, पारंपरिक सीरम एंटीबॉडी को पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी या संक्षेप में पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी भी कहा जाता है।
 
मोनोक्लोनल एंटीबॉडी (मोनोक्लोनल एंटीबॉडी) एक अत्यधिक समान एंटीबॉडी है जो एकल बी सेल क्लोन द्वारा निर्मित होती है और केवल एक विशिष्ट एपिटोप के खिलाफ निर्देशित होती है।यह आमतौर पर हाइब्रिडोमा तकनीक द्वारा तैयार किया जाता है - हाइब्रिडोमा एंटीबॉडी तकनीक सेल फ्यूजन तकनीक पर आधारित है, जो विशिष्ट एंटीबॉडी को स्रावित करने की क्षमता वाली बी कोशिकाओं और अनंत विकास क्षमता वाली मायलोमा कोशिकाओं को बी-सेल हाइब्रिडोमा में जोड़ती है।इस हाइब्रिडोमा कोशिका में मूल कोशिका के गुण होते हैं।यह मायलोमा कोशिकाओं की तरह इन विट्रो में अनिश्चित काल तक और अमर रूप से फैल सकता है, और यह स्प्लेनिक लिम्फोसाइटों जैसे विशिष्ट एंटीबॉडी को संश्लेषित और स्रावित कर सकता है।क्लोनिंग के माध्यम से, एकल हाइब्रिडोमा कोशिका से प्राप्त एक मोनोक्लोनल लाइन, यानी हाइब्रिडोमा सेल लाइन, प्राप्त की जा सकती है।इसके द्वारा उत्पादित एंटीबॉडी एक ही एंटीजेनिक निर्धारक, यानी मोनोक्लोनल एंटीबॉडी के खिलाफ अत्यधिक समरूप एंटीबॉडी हैं।
 
एंटीबॉडीज़ एक या अधिक Y-आकार के मोनोमर्स (यानी, मोनोक्लोनल एंटीबॉडी या पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी) के रूप में मौजूद होते हैं।प्रत्येक Y-आकार का मोनोमर 4 पॉलीपेप्टाइड श्रृंखलाओं से बना होता है, जिसमें दो समान भारी श्रृंखलाएं और दो समान प्रकाश श्रृंखलाएं शामिल होती हैं।हल्की श्रृंखला और भारी श्रृंखला का नाम उनके आणविक भार के अनुसार रखा गया है।वाई-आकार की संरचना का शीर्ष परिवर्तनशील क्षेत्र है, जो एंटीजन बाइंडिंग साइट है।(डेटाई बायो-मोनोक्लोनल एंटीबॉडी अवधारणा से अंश)
 
एंटीबॉडी संरचना
भारी ज़ंजीर
स्तनधारी आईजी हेवी चेन पांच प्रकार की होती हैं, जिनका नाम ग्रीक अक्षरों α, δ, ε, γ और μ से रखा गया है।संबंधित एंटीबॉडी को IgA, IgD, IgE, IgG और IgM कहा जाता है।विभिन्न भारी श्रृंखलाएँ आकार और संरचना में भिन्न होती हैं।α और γ में लगभग 450 अमीनो एसिड होते हैं, जबकि μ और ε में लगभग 550 अमीनो एसिड होते हैं।
प्रत्येक भारी श्रृंखला में दो क्षेत्र होते हैं: स्थिर क्षेत्र और परिवर्तनशील क्षेत्र।एक ही प्रकार के सभी एंटीबॉडी का स्थिर क्षेत्र समान होता है, लेकिन विभिन्न प्रकार के एंटीबॉडी के बीच अंतर होता है।भारी श्रृंखलाओं γ, α, और δ के स्थिर क्षेत्र एक साथ तीन Ig डोमेन से बने होते हैं, जिसमें इसके लचीलेपन को बढ़ाने के लिए एक काज क्षेत्र होता है;भारी श्रृंखला μ और ε के स्थिर क्षेत्र 4 आईजी डोमेन से बने होते हैं।विभिन्न बी कोशिकाओं द्वारा निर्मित एंटीबॉडी की भारी श्रृंखला का परिवर्तनशील क्षेत्र अलग-अलग होता है, लेकिन एक ही बी कोशिका या सेल क्लोन द्वारा उत्पादित एंटीबॉडी का परिवर्तनशील क्षेत्र समान होता है, और प्रत्येक भारी श्रृंखला का परिवर्तनशील क्षेत्र लंबाई में लगभग 110 अमीनो एसिड होता है।, और एक एकल आईजी डोमेन बनाएं।
 
हल्की जंजीर
स्तनधारियों में केवल दो प्रकार की प्रकाश श्रृंखलाएँ होती हैं: लैम्ब्डा प्रकार और कप्पा प्रकार।प्रत्येक प्रकाश श्रृंखला में दो जुड़े हुए डोमेन होते हैं: एक स्थिर क्षेत्र और एक परिवर्तनशील क्षेत्र।प्रकाश श्रृंखला की लंबाई लगभग 211~217 अमीनो एसिड होती है।प्रत्येक एंटीबॉडी में निहित दो प्रकाश श्रृंखलाएं हमेशा समान होती हैं।स्तनधारियों के लिए, प्रत्येक एंटीबॉडी में प्रकाश श्रृंखला का केवल एक ही प्रकार होता है: कप्पा या लैम्ब्डा।कुछ निचली कशेरुकियों, जैसे कार्टिलाजिनस मछलियाँ (कार्टिलेज मछलियाँ) और बोनी मछलियाँ, में अन्य प्रकार की प्रकाश श्रृंखलाएँ जैसे आयोटा (आईओटा) प्रकार भी पाई जाती हैं।
 
फैब और एफसी खंड
एंटीबॉडी को लेबल करने के लिए एफसी सेगमेंट को सीधे एंजाइम या फ्लोरोसेंट रंगों के साथ जोड़ा जा सकता है।यह वह हिस्सा है जहां एलिसा प्रक्रिया के दौरान एंटीबॉडी प्लेट पर रिवेट करती है, और यह वह हिस्सा भी है जहां दूसरे एंटीबॉडी को पहचाना जाता है और इम्यूनोप्रेजर्वेशन, इम्यूनोब्लॉटिंग और इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री में बांधा जाता है।एंटीबॉडी को पपैन जैसे प्रोटियोलिटिक एंजाइमों द्वारा दो एफ (एबी) खंडों और एक एफसी खंड में हाइड्रोलाइज किया जा सकता है, या उन्हें पेप्सिन द्वारा हिंज क्षेत्र से तोड़ा जा सकता है और एक एफ (एबी) 2 खंड और एक एफसी खंड में हाइड्रोलाइज किया जा सकता है।आईजीजी एंटीबॉडी के टुकड़े कभी-कभी बहुत उपयोगी होते हैं।एफसी खंड की कमी के कारण, एफ(एबी) खंड एंटीजन के साथ अवक्षेपित नहीं होगा, न ही इसे विवो अध्ययनों में प्रतिरक्षा कोशिकाओं द्वारा कब्जा कर लिया जाएगा।छोटे आणविक टुकड़ों और क्रॉस-लिंकिंग फ़ंक्शन की कमी (एफसी सेगमेंट की कमी के कारण) के कारण, फैब सेगमेंट का उपयोग आमतौर पर कार्यात्मक अध्ययनों में रेडियोलेबलिंग के लिए किया जाता है, और एफसी सेगमेंट का उपयोग मुख्य रूप से हिस्टोकेमिकल धुंधलापन में अवरोधक एजेंट के रूप में किया जाता है।
 
परिवर्तनशील और स्थिर क्षेत्र
परिवर्तनशील क्षेत्र (वी क्षेत्र) एन-टर्मिनस के पास एच श्रृंखला के 1/5 या 1/4 (लगभग 118 अमीनो एसिड अवशेषों से युक्त) पर स्थित है और 1/2 (लगभग 108-111 अमीनो एसिड अवशेषों से युक्त) एल श्रृंखला के एन-टर्मिनस के पास स्थित है।प्रत्येक वी क्षेत्र में इंट्रा-चेन डाइसल्फ़ाइड बॉन्ड द्वारा गठित एक पेप्टाइड रिंग होती है, और प्रत्येक पेप्टाइड रिंग में लगभग 67 से 75 अमीनो एसिड अवशेष होते हैं।वी क्षेत्र में अमीनो एसिड की संरचना और व्यवस्था एंटीबॉडी की एंटीजन बाइंडिंग विशिष्टता निर्धारित करती है।वी क्षेत्र में अमीनो एसिड के लगातार बदलते प्रकार और अनुक्रम के कारण, विभिन्न बाध्यकारी एंटीजन विशिष्टताओं के साथ कई प्रकार के एंटीबॉडी बन सकते हैं।एल श्रृंखला और एच श्रृंखला के वी क्षेत्रों को क्रमशः वीएल और वीएच कहा जाता है।वीएल और वीएच में, कुछ स्थानीय क्षेत्रों के अमीनो एसिड संरचना और अनुक्रम में उच्च स्तर की भिन्नता होती है।इन क्षेत्रों को हाइपरवेरिएबल क्षेत्र (HVR) कहा जाता है।वी क्षेत्र में गैर-एचवीआर भागों की अमीनो एसिड संरचना और व्यवस्था अपेक्षाकृत रूढ़िवादी है, जिसे फ्रेमवर्क क्षेत्र कहा जाता है।वीएल में तीन हाइपरवेरिएबल क्षेत्र होते हैं, जो आमतौर पर अमीनो एसिड अवशेष क्रमशः 24 से 34 और 89 से 97 पर स्थित होते हैं।वीएल और वीएच के तीन एचवीआर को क्रमशः एचवीआर1, एचवीआर2 और एचवीआर3 कहा जाता है।एक्स-रे क्रिस्टल विवर्तन के अनुसंधान और विश्लेषण से साबित हुआ कि हाइपरवेरिएबल क्षेत्र वास्तव में वह स्थान है जहां एंटीबॉडी एंटीजन बंधता है, इसलिए इसे पूरकता-निर्धारण क्षेत्र (सीडीआर) कहा जाता है।वीएल और वीएच के एचवीआर1, एचवीआर2 और एचवीआर3 को क्रमशः सीडीआर1, सीडीआर2 और सीडीआर3 कहा जा सकता है।आम तौर पर, CDR3 में उच्च स्तर की हाइपरपरिवर्तनशीलता होती है।हाइपरवेरिएबल क्षेत्र वह मुख्य स्थान भी है जहां आईजी अणुओं के अज्ञात निर्धारक मौजूद हैं।ज्यादातर मामलों में, एच श्रृंखला एंटीजन से जुड़ने में अधिक महत्वपूर्ण भूमिका निभाती है।
स्थिर क्षेत्र (सी क्षेत्र)सी टर्मिनस के पास एच श्रृंखला के 3/4 या 4/5 (लगभग अमीनो एसिड 119 से सी टर्मिनल तक) और एल श्रृंखला के सी टर्मिनस के पास 1/2 (लगभग 105 अमीनो एसिड अवशेष होते हैं) पर स्थित है।एच श्रृंखला के प्रत्येक कार्यात्मक क्षेत्र में लगभग 110 अमीनो एसिड अवशेष होते हैं, और इसमें डाइसल्फ़ाइड बांड से जुड़े 50-60 अमीनो एसिड अवशेषों से बना एक पेप्टाइड रिंग होता है।इस क्षेत्र की अमीनो एसिड संरचना और व्यवस्था एक ही पशु आईजी आइसोटाइप एल श्रृंखला और एक ही प्रकार की एच श्रृंखला में अपेक्षाकृत स्थिर होती है।वही, यह केवल विशेष रूप से संबंधित एंटीजन से बंध सकता है, लेकिन इसके सी क्षेत्र की संरचना समान है, यानी इसमें एंटीजेनेसिटी समान है।घोड़ा विरोधी मानव आईजीजी माध्यमिक एंटीबॉडी (या एंटी-एंटीबॉडी) को दो के साथ जोड़ा जा सकता है विभिन्न एक्सोटॉक्सिन के खिलाफ एंटीबॉडी (आईजीजी) का एक संयोजन होता है।यह द्वितीयक एंटीबॉडी तैयार करने और फ़्लोरेसिन, आइसोटोप, एंजाइम और अन्य लेबल एंटीबॉडी लगाने के लिए एक महत्वपूर्ण आधार है।
 
 
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