एंडोफ्री मैक्सी प्लास्मिड किट (स्पिन कॉलम)
विवरण
एंडोफ्री मैक्सी प्लास्मिड किट प्लास्मिड डीएनए को कुशलतापूर्वक और विशेष रूप से बांधने के लिए एक अद्वितीय सिलिका झिल्ली सोखना तकनीक को अपनाता है।विशेष एंडोटॉक्सिन रिमूवल बफर पी4 और एंडोफ्री मैक्सी फिल्ट्रेशन कॉलम के संयोजन से एंडोटॉक्सिन, प्रोटीन और अन्य अशुद्धियों को प्रभावी ढंग से हटाया जा सकता है।संपूर्ण निष्कर्षण प्रक्रिया में केवल 1 घंटा लगता है, जिससे सुविधाजनक और त्वरित संचालन सुनिश्चित होता है।
प्रत्येक अभ्यास के लिए अनुशंसित बैक्टीरिया की मात्रा: उच्च-कॉपी प्लास्मिड के लिए, 100 मिलीलीटर बैक्टीरिया कल्चर मीडिया का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है, और जिससे उपज आम तौर पर लगभग 500-1500 μg होती है।कम-कॉपी प्लास्मिड के लिए, लगभग 200-600 μg प्लास्मिड उत्पन्न करने के लिए 200 मिलीलीटर बैक्टीरिया कल्चर मीडिया की सिफारिश की जाती है।
किट घटक
उत्पाद अवयव | D909-ई(10 तैयारी) |
बफर बीएल | 30 मि.ली |
बफ़र P1 | 100 मि.ली |
बफर पी2 | 100 मि.ली |
बफर पी4 | 100 मि.ली |
बफर DW2 | 44 मि.ली |
बफर ईबी | 30 मि.ली |
आरएनएसई ए(10 मिलीग्राम/एमएल) | 1 मिली |
DNAPure मैक्सी स्पिन कॉलम | 10 पीसी |
फाइनप्योर मैक्सी फ़िल्टर सिरिंज | 10 पीसी |
50 मिलीलीटर संग्रह ट्यूब | 10 पीसी |
प्लास्मिड डीएनए एकाग्रता और शुद्धता का पता लगाना
निकाले गए प्लास्मिड डीएनए की शुद्धता और एकाग्रता का पता एग्रोस जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस और एक पराबैंगनी स्पेक्ट्रोफोटोमीटर द्वारा लगाया जा सकता है।1 का OD260 मान लगभग 50 μg/ml डबल स्ट्रैंडेड डीएनए से मेल खाता है।शुद्ध प्लास्मिड डीएनए का OD260/OD280 मान आम तौर पर 1.7-1.9 की सीमा में होता है।शुद्ध प्लास्मिड डीएनए को उच्च शुद्धता आवश्यकताओं वाले प्रयोगों, जैसे सेल ट्रांसफ़ेक्शन या विवो प्रयोगों में सीधे लागू किया जा सकता है।
किट आवेदन
इस किट द्वारा निकाले गए प्लास्मिड डीएनए को विभिन्न नियमित कार्यों में लागू किया जा सकता है, जिसमें एंजाइमैटिक पाचन, पीसीआर, अनुक्रमण, बंधाव, परिवर्तन के साथ-साथ विभिन्न प्रकार की कोशिकाओं के लिए ट्रांसफ़ेक्शन भी शामिल है।
भंडारण और शेल्फ जीवन
एंडोफ्री मैक्सी प्लास्मिड किट को कमरे के तापमान (15-25 डिग्री सेल्सियस) पर शुष्क परिस्थितियों में 12 महीने तक संग्रहीत किया जा सकता है।पहले उपयोग से पहले बफर P1 में RNase A मिलाएं, अच्छी तरह मिलाएं और 2-8°C पर स्टोर करें।मिश्रण को 6 महीने से अधिक समय तक स्थिर रूप से संग्रहीत किया जा सकता है।