डायरेक्ट आरटी-क्यूपीसीआर किट
किट विवरण:
◮ डायरेक्ट आरटी-क्यूपीसीआर किट, फॉरेजीन द्वारा विकसित फोरेजी रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस और फोरेजी एचएस टैक डीएनए पॉलीमरेज़ का उपयोग करके, अद्वितीय प्रतिक्रिया बफर के साथ, इस किट को मजबूत प्रतिरोध और अनुकूलता के साथ बनाता है, और यह सीधे प्रतिक्रिया का परीक्षण कर सकता है, फोरेजीन लिसिस सिस्टम को टेम्पलेट के रूप में उपयोग कर सकता है।यह किट COVID-19 न्यूक्लिक एसिड डिटेक्शन किट और अन्य रोगजनक बैक्टीरिया न्यूक्लिक एसिड डिटेक्शन किट विकास के लिए आवेदन कर सकती है।
विवरण
डायरेक्ट आरटी-क्यूपीसीआर किट अलग से पैक किया गया आरटी-क्यूपीसीआर बफर और उच्च कुशल एंजाइम प्रदान करता हैमिश्रण (Taq、M-MLV、RI), जो इसे बैक-एंड किट और सिस्टम बनाने के लिए सुविधाजनक बनाता हैसरल सत्यापन के भीतर समायोजन।
विशेष विवरण
500टी, 50,000टी
किट घटक
| किट सामग्री (20 μL प्रतिक्रिया प्रणाली) | आईएम-05111-01 | आईएम-05112-01 |
| 500 टी | 50,000 टी | |
| प्रत्यक्ष एंजाइम मिश्रण | 500 μL×1 | 50 एमएल×1 |
| 2× डायरेक्ट आरटी-क्यूपीसीआर बफर | 1 एमएल×5 | 500 एमएल×1 |
| अनुदेश | 1 | 1 |
परिचालन चरण
अभिकर्मक तैयार करने से पहले, किट के सभी अभिकर्मकों को कमरे के तापमान पर पिघलाया जाना चाहिए और धीरे से मिलाया जाना चाहिए।
A: तैयार करना of खाका और अभिकर्मक
1. तैयार आरएनए टेम्पलेट तैयार करें (आरएनए टेम्पलेट को निकालने और शुद्ध करने के लिए फोरजीन टोटल आरएनए आइसोलेशन किट श्रृंखला किट का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है) या नमूना क्रैकिंग उत्पाद (फोरजीन लिसिस सिस्टम का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है), विशिष्ट प्राइमर (10 μM) और अन्य प्रासंगिक उपभोग्य वस्तुएं, उपकरण।
2. 2× डायरेक्ट आरटी-क्यूपीसीआर बफर, आरएनएएस-फ्री डीडीएच2ओ और 20× आरओएक्स रेफरेंस डाई लगाएं (यदि यह'(की आवश्यकता है) बर्फ के साथ बॉक्स में, इन्हें प्राकृतिक रूप से पिघलाएं, और धीरे से मिश्रित करें।
B: तैयार करना of आरटी-क्यूपीसीआर प्रणाली
मेज 1 : तैयार करना of आरटी-क्यूपीसीआर sप्रणाली
| अवयव | आयतन | अंतिम एकाग्रता |
| 2× डायरेक्ट आरटी-क्यूपीसीआर बफर | 10 μL | 1× |
| प्रत्यक्ष एंजाइम मिश्रण | 1μL | |
| फॉरवर्ड प्राइमर(10 μM) | 0.8 μL | 50-900 एनएम |
| रिवर्स प्राइमर(10 μM) | 0.8 μL | 50-900 एनएम |
| जांच(4 μM) | 1μL | 200nM |
| टेम्पलेट (आरएनए या लाइसेट) | एक्स μL | |
| 20×आरओएक्स संदर्भ डाई | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-एक्स) μL | |
| कुल मात्रा | 20μL |
C: तय करना आरटी-क्यूपीसीR प्रतिक्रिया कार्यक्रम
मेज 2 : आरटी-क्यूपीसीआर प्रतिक्रियाon कार्यक्रम सेटिंग (के लिए उदाहरण: दो-कदम तरीका)
| कदम | तापमान | समय | साइकिल | संतुष्ट | |
| 1 | 50℃ | 15 मिनट | 1* | 1 | रिवर्स प्रतिलेखन |
| 2 | 95℃ | 1 मिनट | 1 | पूर्व विकृतीकरण | |
| 3 | 95℃ | 10 सेकंड | 40-45 | विकृतीकरण | |
| 60℃ | 30 सेकंड 2* | एनील/विस्तार | |||
भंडारण और शेल्फ जीवन
-किट को -20 पर संग्रहित किया जाना चाहिए± 5℃.वैधता अवधि 12 महीने है.
-बार-बार जमने-पिघलने के चक्र (<5 चक्र) से बचें।
