फ़ोरडायरेक्ट आरटी-क्यूपीसीआर किट
किट विवरण:
◮आरएनए के लिए आरएनए शुद्धिकरण प्रक्रियाओं के बिना स्वाब संग्रह से प्रत्यक्ष वास्तविक समय प्रवर्धन।यह किट एक घंटे के भीतर क्यूआरटी-पीसीआर चक्र पूरा कर लेती है।एंजाइम मिश्रण रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस, हॉट-स्टार्ट टैक डीएनए पोलीमरेज़, आरएनज़ अवरोधक का एक अनुकूलित मिश्रण है।रिएक्शन बफ़र में अनुकूलित बफ़र घटकों, एमजी सहित सभी आवश्यक घटक शामिल हैं2+, dUTP, और dNTPs।
विवरण
फ़ोरडायरेक्ट आरटी-क्यूपीसीआर किट को आरएनए शुद्धिकरण प्रक्रियाओं के बिना स्वाब संग्रह से आरएनए प्रत्यक्ष वास्तविक समय प्रवर्धन के लिए डिज़ाइन किया गया है।यह किट एक घंटे के भीतर क्यूआरटी-पीसीआर चक्र पूरा कर लेती है।एंजाइम मिश्रण रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस, हॉट-स्टार्ट टैक डीएनए पोलीमरेज़, आरएनज़ अवरोधक का एक अनुकूलित मिश्रण है।रिएक्शन बफ़र में अनुकूलित बफ़र घटकों, एमजी सहित सभी आवश्यक घटक शामिल हैं2+, dUTP, और dNTPs।
विशेष विवरण
100टी
किट घटक
| न्यूक्लिक एसिड रिलीज एजेंट |
| आरएनए रक्षक |
| 2× आरटी-क्यूपीसीआर बफर |
| एंजाइम मिश्रण (Taq&M-MLV) |
| निर्देश |
पीसीआर आवेदन
1. एक बार पीसीआर प्रतिक्रिया ट्यूबों को संक्षेप में सेंट्रीफ्यूज कर दिया जाए, तो उन्हें प्रवर्धन उपकरण के नमूना टैंक में रखें।
2. थर्मल प्रोटोकॉल
| कदम | तापमान | समय | साइकिल | |
| 1 | रिवर्स प्रतिलेखन | 50℃ | 15 मिनट | 1 |
| 2 | पूर्व विकृतीकरण | 95℃ | 1 मिनट | 1 |
| 3 | विकृतीकरण | 95℃ | दस पल | 42 |
| 4 | एनील/विस्तार | 60℃ | 30 सेकंड | |
टिप्पणी:प्रत्येक चक्र के विस्तार चरण के तुरंत बाद फ्लोरोसेंट सिग्नल का पता लगाया गया।
3. सेटिंग के बाद फाइल को सेव करें और रिएक्शन प्रोग्राम चलाएं।
परिचालन चरण
अभिकर्मक तैयार करने से पहले, किट के सभी अभिकर्मकों को कमरे के तापमान पर पिघलाया जाना चाहिए और धीरे से मिलाया जाना चाहिए।
अभिकर्मक तैयारी
1. न्यूक्लिक एसिड रिलीज़ मिक्स तैयार करें
| अवयव | प्रति नमूना या नियंत्रण मात्रा |
| न्यूक्लिक एसिड रिलीज एजेंट | 5μL |
| आरएनए रक्षक | 0.5 μL |
2. प्रतिक्रिया मिश्रण तैयार करें
| अवयव | प्रति नमूना या नियंत्रण मात्रा |
| 2× आरटी-क्यूपीसीआर बफर | 15 μL |
| एंजाइम मिश्रण (Taq&M-MLV) | 1.5 μL |
| प्राइमर और जांच | 1μL |
भंडारण और शेल्फ जीवन
-किट को -20 पर संग्रहित किया जाना चाहिए± 5℃.वैधता अवधि 12 महीने है.
-बार-बार जमने-पिघलने के चक्र (<5 चक्र) से बचें।
